实验指南

细胞冻存是细胞培养比较大的难点，由于不同细胞特性不同，实际冻存效果也会有差异，如果发现细胞冻存有异常，需尽量调整冻存策略以保证细胞冻存效果。

支原体污染是一种非常常见而且难以观察到的污染，支原体污染的细胞无法通过肉眼或者普通光学显微镜观察并判断，只能通过技术方法进行检测。目前检测支原体方法主要有：荧光染色法、支原体培养法、化学发光法、PCR...

胰酶消化细胞时消化时间过长或者过短都会对细胞造成损伤，轻则细胞传代死亡偏多，重则细胞传代完全不长、碎片增多逐渐死亡。因此需要尤其注意控制消化时间，建议让经验丰富的技术人员处理细胞，尤其是刚收货的细胞对于消化、吹打等操作更为敏感，操作不慎很容易出现问题。

胰酶浓度没有具体要求，只要消化活性合适，0.05%还是0.25%均可用于细胞消化，控制好细胞消化时间即可，部分贴壁较弱的细胞使用0.05%胰酶更容易控制消化时间。

由于不同品牌、批次的培养基及血清实际培养效果差异，细胞在更换培养条件后可能生长状态改变，生长速度变慢、甚至不长的情况时有发生，此时建议及时更换合适的培养基及血清，或使用尚恩生物原装培养基培养细胞对比。