一、HeLa细胞基本属性 |
|
| 细胞名称 | HeLa(人宫颈癌细胞) |
| 细胞别称 | HELA; Hela; HeLa; He-La; HeLa-CCL2; HenriettaLackscells; Helacytongartleri |
| 细胞货号 | SNL-062 |
| 来源 | 宫颈癌；女性；31岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 2 |
| 致瘤性 | |
| 培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | HeLa细胞是第一个来自人体组织经连续培养获得的非整倍体上皮样细胞系，是由GeyGO等在1951年从31岁女性黑人的宫颈癌组织建立的，经原始组织切片重新观察，Jones等将其诊断为腺癌。HeLa细胞角蛋白阳性，p53表达量较低，但表达正常水平的pRB（视网膜母细胞瘤抑制因子）。HeLa细胞含有人乳头状瘤病毒HPV18序列，需在2级生物安全防护台操作。HeLa细胞可以用于3D细胞培养和生物制品生产，也是一种合适的转染宿主，还可用于筛选具有侵袭潜力的大肠杆菌菌株。 |
二、HeLa细胞培养操作 |
|
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、HeLa细胞冻存操作 |
|
| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞培养时可能会有部分黑点，属正常现象，具体原因参见培养操作说明2、3条； 2.HELA系列存在较多衍生系，我司对STR鉴定结果保证与本细胞匹配大于0.8，但不保证匹配结果在诸多衍生系中排列第一；
我们推荐使用尚恩生物 人宫颈癌细胞专用培养基（产品货号：SNLM-062）作为HeLa(人宫颈癌细胞)的专用培养基。
