一、293[HEK 293]细胞基本属性 |
|
细胞名称 | 293[HEK 293](人胚肾细胞) |
细胞别称 | Hek293;HEK-293;HEK293;HEK:293;293;293HEK;HumanEmbryonicKidney293 |
细胞货号 | SNL-014 |
来源 | 胚胎;肾;5型腺病毒转化;女性 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞类型 | 转化细胞系 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 2 |
致瘤性 | Yes, forms tumors in nude mice. |
培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | 293 [HEK-293]细胞人类胚胎的肾脏中分离的表现出上皮形态的细胞,后经剪切过的人腺病毒5(Ad5)转染获得的永生化细胞,细胞包含并表达转染的Ad5基因,表达玻连蛋白。早期报道中指出,293 [HEK-293]细胞基因组中含有腺病毒5(Ad5)基因组的左侧端和右侧端的DNA,但是现在明确了只存在其左侧端的DNA。经过对Ad5的插入点测序发现,Ad5的1-4344位线性核苷酸整合入293 [HEK-293]细胞19号染色体(19q13.2)。293 [HEK-293]细胞可以作为人类腺病毒载体扩增的宿主,可表达异常的玻连蛋白的细胞表面受体,由整合素β1亚单位和玻连蛋白受体α-v亚单位组成。293 [HEK-293]细胞可用于工业生物技术和毒理学研究,功效测试和病毒测试中也有应用。 |
二、293[HEK 293]细胞培养操作 |
|
换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基; 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS; 3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层; 4.将培养瓶放入37度培养箱消化; 5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化; 6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清; 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、293[HEK 293]细胞冻存操作 |
|
冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞贴壁较弱,消化时间偏短,注意控制消化时间; 2.T25瓶细胞发货易漂浮成团,收货若成团按收货处理规定进行; 3.细胞培养时可能会有部分黑点,属正常现象,具体原因参见培养操作说明2、3条; 4.293系列存在较多衍生系,我司对STR鉴定结果保证与本细胞匹配大于0.8,但不保证匹配结果在诸多衍生系中排列第一;
我们推荐使用尚恩生物 人胚肾细胞专用培养基(产品货号:SNLM-014)作为293[HEK 293](人胚肾细胞)的专用培养基。