细胞増殖检测试剂盒

EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名5-乙炔基-2-脱氧尿苷,是胸腺嘧啶脱氧核苷类似物,EdU可以在DNA合成过程中替代胸腺嘧啶脱氧核苷掺入到新合成的DNA中。同时,掺入到DNA的EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针,通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Click reaction)。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的荧光探针所标记,从而可以使用适当的荧光检测设备检测到增殖的细胞。

细胞增殖检测广泛应用于细胞活性、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的评价中,直接检测细胞中的DNA合成被认为是最精确的检测细胞增殖的方法。最初广泛使用的检测细胞中DNA合成的方法是放射性标记核苷掺入法,但该方法由于有放射性污染并且很难实现单细胞检测而受到很大的限制,随后逐渐被基于抗体检测的BrdU法所替代。BrdU法步骤繁多,且需要使用BrdU抗体,影响因素较多,稳定性较差。EdU法基于EdU掺入和后续的点击反应,无需使用抗体、操作便捷、检测灵敏度高,是一种在BrdU法基础上升级换代的新方法,将会逐步取代BrdU法。同时与MTT/CCK8相比,MTT/CCK8只能检测群体细胞增殖,而EDU法除了可以检测群体细胞增殖,确定经过DNA合成的细胞比例,同时还可以检测单细胞是否进行DNA合成或增殖,检测更精准。

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EDU应用范围

  • 动物活体注射实验
  • 植物成像实验
  • DNA损伤修复检测
  • 病毒增殖活性检测
  • 药物的筛选实验
  • 其他与DNA复制相关的实验

EDU检测优势

  • 无放射性物质

    对实验人员及环境友好

  • 不依赖抗体免疫反应

    不依赖抗体免疫反应

  • 不引起DNA变性

    对细胞增殖影响小

  • 实验步骤少

    操作简单

EDU与BrdU方法对比

对比项目 BrdU EDU
检测分子 很小
检测方式 免疫反应 化学反应
是否影响其他标记
DNA变性 变性 不变性
实验时间
灵敏度 一般 灵敏
是否高通量

细胞增殖/毒性检测试剂盒(EDU法)产品示例

  • Test:HL-60细胞用10μM的EDU处理4个小时
  • Negative:HL-60细胞没加EDU处理

FAQs

  • 怎么选择合适的EDU试剂盒?

    首先根据检测仪器的类型选择,流式的选择流式检测试剂盒,荧光显微镜选择爬片检测试剂盒。其次,细胞样本不带荧光的话,红绿荧光都可选择,通常建议选择绿色荧光试剂盒;若细胞样本带绿色荧光,建议选择红色荧光试剂盒;若细胞本身带红色荧光,建议选绿色荧光试剂盒。

  • EDU带不带放射性?

    EDU不带放射性,对环境及实验人员友好,是放射标记及BrdU法最佳替代方案。

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