一、ES-2细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | ES-2(人卵巢透明细胞癌细胞) |
| 细胞别称 | ES2 |
| 细胞货号 | SNL-299 |
| 来源 | 卵巢透明细胞癌；女性；47岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | Yes, tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. |
| 培养条件 | McCoy's 5a+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | ES-2细胞是建自45岁患有卵巢透明细胞癌女性黑人的外科肿瘤标本，该肿瘤为低分化卵巢透明细胞癌。ES-2细胞最初生长在软琼脂中。ES-2细胞可以在裸鼠中成瘤。ES-2细胞对多种化疗药物包括阿霉素、顺铂、卡氯芥、依托泊甙等表现出低到中等的耐受性。ES-2细胞表达低水平的P糖蛋白。EXPASY细胞库（CVCL_3509）显示细胞可能分类错误：这种细胞系来源于一名被诊断为卵巢透明细胞腺癌的47岁非裔美国人，这一点可能有误，免疫组织化学和qPCR分析及其突变谱证实其为卵巢浆液性腺癌起源（PubMed=25049276；DOI=10.26502/ogr072）；此外，其基因组检测清楚地显示出白人/欧洲血统（PubMed=30894373），这通过mtDNA单倍型鉴定得到证实。 |
二、ES-2细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、ES-2细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.该细胞培养时细胞内部颗粒较多，是正常培养状态，具体原因及处理方式参考操作说明2、3条； 2.该细胞生长速度一般，注意控制细胞密度避免密度过低；
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