一、CAKI-1细胞基本属性 |
|
| 细胞名称 | CAKI-1(人肾透明细胞癌皮肤转移细胞) |
| 细胞别称 | CAKI-1；CaKi-1；caki-1；CAKI.1；CAKI1；CAKI1；Caki1 |
| 细胞货号 | SNL-244 |
| 来源 | 肾透明细胞癌；皮肤转移；男性；49岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | Yes, in nude mice; forms clear cell carcinoma in nude mice consistent with renal primary; also forms tumors in steroid treated hamsters |
| 培养条件 | McCoy's 5a+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | Caki-1细胞是从一名49岁白人男性透明细胞癌患者的肾组织中分离出的。Caki-1细胞超微结构特征包括许多微绒毛、少数丝状体、许多小线粒体、发育良好的高尔基体和内质网、许多脂滴和多层体、次级溶酶体、无病毒颗粒。Caki-1细胞是一种合适的转染宿主，在癌症和毒理学研究中有应用。 |
二、CAKI-1细胞培养操作 |
|
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、CAKI-1细胞冻存操作 |
|
| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞贴壁偏紧，消化时间偏长，注意控制消化时间； 2.细胞培养时黑点可能会比较多，具体原因参见培养操作说明2、3条； 3.培养时有部分细胞会漂浮死亡，漂浮细胞过多时及时换液清除； 4.细胞生长较慢，注意控制传代密度不要过低；
我们推荐使用尚恩生物 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞专用培养基（产品货号：SNLM-244）作为CAKI-1(人肾透明细胞癌皮肤转移细胞)的专用培养基。
