一、HTR8-Svneo细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | HTR8-Svneo(人绒毛膜滋养层细胞) |
| 细胞别称 | HTR-8/SVneo；HTR-8/SV-neo；HTR8/SVneo；HTR8svn |
| 细胞货号 | SNL-212 |
| 来源 | 胎盘；滋养层细胞；6-12孕周;SV40转化 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 转化细胞系 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 2 |
| 致瘤性 | Yes; No (tested in soft agar and nude mice) |
| 培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | HTR-8/SVneo细胞系是通过用编码猴病毒40大T抗原的基因转染从人类早期妊娠胎盘绒毛外植体中生长的细胞而获得的。HTR-8/SVneo细胞表达绒毛外侵袭性滋养层细胞原位特征的多种标志物：胰岛素样生长因子（IGF）-II、NDOG-5、增殖细胞核抗原（PCNA）、人白细胞抗原框架抗原（W6/32）和一组不同的整合素，包括α1、α3、α5、αv和β1亚基以及αvβ3/β5卵磷脂受体。HTR-8/SVneo细胞的巨噬细胞标志物63/D3、内皮细胞标志物因子VIII、α6和β4整合素亚基均为阴性。HTR8-Svneo滋养层细胞可用于研究滋养层生物学和胎盘功能，它们可能会提高我们对肿瘤进展、先兆子痫异常胎盘低侵袭性和滋养细胞肿瘤高侵袭性相关疾病的认识。注意：HTR-8/SVneo细胞系已显示含有上皮和间充质样细胞群。 |
二、HTR8-Svneo细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、HTR8-Svneo细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞培养时可能有部分黑点，具体原因参见培养操作说明2、3条 2.细胞生长较快，注意及时换液及传代；
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