一、C4-2细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | C4-2(人前列腺癌细胞) |
| 细胞别称 | LNCaP-C4-2；LNCaPsublineC4-2；C4-2；C42；Sp2817 |
| 细胞货号 | SNL-160 |
| 来源 | 前列腺癌；左锁骨上淋巴结转移；男性；50岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | |
| 培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | C4-2细胞是从前列腺癌的患者淋巴结转移中分离出人前列腺癌细胞LNCAP的亚系，通过将Horoszewiez，JS et al.Cancer Research 43:1809-1818，1983中所述的人前列腺癌细胞系LNCaP（1 x 10^6细胞；29代）与来自MS骨肉瘤细胞系的人成纤维细胞（1 x 10^6细胞）共同接种到无胸腺雄性裸鼠中，8周后将裸鼠宿主去势，总共12周后切除肿瘤标本，体外培养然后得到C4亚系。C4亚系随后与MS骨肉瘤成纤维细胞在去势的无胸腺雄性裸鼠宿主中通过上述相同的方案共同接种另外12周时，从该宿主中产生的肿瘤培养的前列腺上皮细胞得到C4-2亚系。致瘤性和骨转移：在完整和去势的无胸腺雄性裸鼠体内原位用1 x 10^6的C4-2细胞可以产生100%的致瘤性（分别为20/20和14/14），在完整和去势的小鼠宿主中均检测到骨性前列腺癌转移（分别为2/20和3/14）。C4-2细胞可以在培养基中分泌前列腺特异性抗原。C4-2细胞可以应用于前列腺癌致瘤性、雄激素非依赖性增殖和骨转移研究。 |
二、C4-2细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、C4-2细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞贴壁较弱，消化时间偏短，注意控制消化时间； 2.T25瓶细胞发货易漂浮成团，收货若成团按收货处理规定进行； 3.细胞培养时可能会有部分黑点，属正常现象，具体原因参见培养操作说明2、3条； 4.细胞对温度较为敏感，不要将细胞放置常温过久或用过冷的培养基及PBS处理细胞； 5.LNCAP系列存在较多衍生系，我司对STR鉴定结果保证与本细胞匹配大于0.8，但不保证匹配结果在诸多衍生系中排列第一；
我们推荐使用尚恩生物 人前列腺癌细胞专用培养基（产品货号：SNLM-160）作为C4-2(人前列腺癌细胞)的专用培养基。
