一、U-87 MG细胞基本属性 |
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细胞名称 | U-87 MG(人脑星形胶质母细胞瘤细胞) |
细胞别称 | U-87MG;U-87MG;U87MG;U-87-MG;U87-MG;U87MG;U-87;U87;87MG;87MG |
细胞货号 | SNL-096 |
来源 | 星形胶质母细胞瘤;男性 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | Yes, in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. |
培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | U-87 MG细胞是由Ponten·J等从一名男性患者(可能患有胶质母细胞瘤)的恶性胶质瘤中分离出来, 是J.Ponten及其同事于1966年至1969年建立的来自恶性胶质瘤的多种细胞系之一(其它包括U-118 MG、U-138 MG和 U-373 MG)。STR分析、Y染色体绘制和Q带分析证实该细胞系起源于男性。根据目前的文献,U-87 MG细胞可能是CNS来源的胶质母细胞瘤(Allen,2016)。支原体污染于1975年9月消除。U-87 MG细胞可以用于3D细胞培养、神经科学和免疫肿瘤学研究,也是一种合适的转染宿主。 |
二、U-87 MG细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基; 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS; 3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层; 4.将培养瓶放入37度培养箱消化; 5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化; 6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清; 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、U-87 MG细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞贴壁弱,消化时间短,注意控制消化时间; 2.细胞传代容易成团聚集,注意尽量吹散细胞;细胞生长偏慢,注意控制细胞密度不要过低;? 3.细胞密度过高时及时传代,避免培养基变黄导致细胞脱落或者状态变差
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