MRC-5(人胚肺细胞)

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SKU: SNL-018 分类: 标签: 收录: 中科院培养基: DMEM来源: 胚胎;肺;成纤维细胞;男性规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶

一、MRC-5细胞基本属性

细胞名称 MRC-5(人胚肺细胞)
细胞别称 MRC5; MRC 5; MRCV; MRC-V; Medical Research Council cell strain-5
细胞货号 SNL-018
来源 胚胎;肺;成纤维细胞;男性;14孕周
细胞形态 成纤维细胞样
细胞类型 正常细胞
生长特性 贴壁细胞
收录 中科院NCACC
生物安全等级 1
致瘤性
培养条件 DMEM+10% FBS+1% P/S
培养环境 空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%
细胞简介 MRC-5细胞来自14周龄男性胎儿的正常肺组织,细胞老化前能传代42-46次(国内细胞大多老化,最多只能传10-20代)。MRC-5细胞是正常二倍体细胞系,46条染色体、XY核型,模式染色体数为46,概率为70%,多倍体率为3.6%。(注:细胞遗传学信息基于ATCC的初始种子库存,文献报道了细胞遗传学不稳定性。)

二、MRC-5细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、MRC-5细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞培养时黑点可能会比较多,具体原因参见培养操作说明2、3条; 2.细胞贴壁偏弱,消化时间过长可能会导致传代后细胞不长,注意严格控制消化时间; 3.细胞传代数有限,建议收货后5-6代内完成实验;

我们推荐使用尚恩生物 人胚肺细胞专用培养基(产品货号:SNLM-018)作为MRC-5(人胚肺细胞)的专用培养基。

MRC-5(人胚肺细胞)收货处理方式

MRC-5(人胚肺细胞)培养操作说明

MRC-5(人胚肺细胞)售后规定

MRC-5细胞STR分型结果及匹配其细胞库信息

细胞基因分型图谱