一、HUT 102细胞基本属性 |
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细胞名称 | HUT 102(人T淋巴瘤细胞) |
细胞别称 | HUT 102; Hut 102; HuT-102; Hut-102; HUT-102; HuT102; Hut102; HUT102; NCI-H102 |
细胞货号 | SNL-719 |
来源 | 典型蕈样肉芽肿T细胞;男性;28岁 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
细胞类型 | |
生长特性 | 悬浮细胞 |
收录 | 协和细胞库PUMC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | |
培养条件 | 1640+10% FBS+100U/mL IL-2+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | HUT102最初是从一名成人T细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)患者的外周血中分离建立的,是一株T细胞淋巴瘤细胞系。该细胞具有成熟T细胞系的特征,细胞表面呈现IL-2活性,E花环阳性,表面免疫球蛋白、EBV核抗原和TdT(Terminaldeoxyribonucleotidyl-transferase)反应阴性。该细胞系还可释放与T细胞淋巴瘤相关的单一C型逆转病毒(retrovirus),即HTLVI病毒。 |
二、HUT 102细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清; 2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 3.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 部分悬浮细胞会附着瓶底,轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、HUT 102细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80 度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20 度静置 2h 后转入-80 度过夜,第二天转入液氮保存。 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞增殖偏慢,均为悬浮生长,大部分细胞聚集成团,少数分散的细胞,并且细胞间隙会有较多的死细胞和细胞碎片; 2.该细胞对温度,吹打力度,培养条件均很敏感;培养基、PBS等建议复温至37℃再使用,吹打力度过大容易造成大量细胞死亡; 3.该细胞对培养基及血清要求较高,强烈建议选择尚恩生物专用培养基(货号SNLM-719)培养; 4.该细胞冻存难度较大,建议使用92S+8%DMSO冻存液配方冻存; 5.建议悬浮细胞密度维持在1E5-5E5/mL之间,密度过低或者过高可能会影响细胞状态;
我们推荐使用尚恩生物 人T淋巴瘤细胞专用培养基(产品货号:SNLM-719)作为HUT 102(人T淋巴瘤细胞)的专用培养基。