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NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)

¥980.00

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货号: SNL-579 分类: 收录: ATCC培养基: 1640+10% FBS+1% P/S来源: 肺鳞癌;男性规格: 1×10⁶Cells/T25培养瓶或1mL冻存管

一、NCI-H2170细胞基本属性

细胞名称 NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)
细胞别称 H2170; H-2170; NCIH2170
细胞货号 SNL-579
来源 肺鳞癌;男性
细胞形态 上皮细胞样(不规则形成片生长,细胞间边界模糊)
细胞类型
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 1
致瘤性
培养条件 1640+10% FBS+1% P/S
培养环境 37℃;5% CO2;饱和湿度
细胞简介 NCI-H2170[H2170]细胞是1989年4月建系的,是从患有鳞状细胞癌的非吸烟男性患者的肺中分离的细胞系。

二、NCI-H2170细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、NCI-H2170细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

我们推荐使用尚恩生物 人肺鳞癌细胞专用培养基(产品货号:SNLM-579)作为NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)的专用培养基。

NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)收货处理方式

NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)培养操作说明

NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)售后规定

NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息
NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息

细胞基因分型图谱
NCI-H2170(人肺鳞癌细胞)细胞基因分型图谱

NCI-H2170细胞为何呈现岛状/片状生长模式?是否影响实验操作??

NCI-H2170人肺鳞癌细胞的岛状/片状生长是其固有特性,由细胞间紧密连接和上皮细胞特征决定,并非异常聚团现象,不会影响实验。但需注意该形态下细胞实际密度较高,当覆盖率达70%-80%时(显微镜下看似未满瓶),需及时以1:2比例传代,避免代谢废物堆积导致生长停滞。因为NCI-H2170贴壁紧、细胞间连接紧密,较难消化。操作时需使用0.25%胰酶(含EDTA)置于37度培养箱消化,待细胞部分脱落后,吸取胰酶先轻柔吹打分散细胞,再加完全培养基终止消化避免复贴。

为什么NCI-H2170细胞培养中会出现大量黑点?如何有效处理??

NCI-H2170人肺鳞癌细胞培养过程中出现的黑点多为细胞代谢产物和碎片,不影响生长。若黑点较多,可以吸走培养基后用PBS润洗;润洗不能清除的可以消化细胞重新接种,消化完成后加完全培养基终止消化,混匀细胞,收集细胞悬液900-1000rpm(约150g)离心3min,弃上清。再加5ml PBS重悬细胞,再离心后,用完全培养基重悬接种到新的培养皿。第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗几次。

NCI-H2170细胞培养为何总存在漂浮细胞?如何正确处理??

NCI-H2170人肺鳞癌细胞在培养时培养过程中一直伴随部分漂浮细胞,是其固有特性,尤其在复苏和传代初期更为明显。这些漂浮细胞仍具有活性,若细胞密度较低,建议换液时将漂浮细胞以1000rpm,3min离心后回补至原培养瓶,避免细胞密度低导致细胞不增殖。若贴壁细胞密度较高(> 50%),状态较好,则无需收集漂浮细胞。

如何优化NCI-H2170细胞的贴壁条件以提高培养效率??

NCI-H2170人肺鳞癌细胞贴壁较慢,传代或复苏后需在37℃、5%CO2培养箱静置48小时以上以完成贴壁,期间避免频繁观察(建议每24小时显微观察一次,每次<2分钟)。初始贴壁时细胞呈团簇聚集,此为正常现象,无需干预,后续会逐渐延展为单层。若48小时后仍有较多漂浮细胞,可离心(1000rpm×3min)回收后与原瓶细胞合并培养,同时保持2-3天换液频率以维持代谢平衡。