一、RWPE-1细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | RWPE-1(人正常前列腺上皮细胞) |
| 细胞别称 | RWPE1 |
| 细胞货号 | SNL-569 |
| 来源 | 前列腺上皮细胞；男性；54岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 2 |
| 致瘤性 | |
| 培养条件 | Defined K-SFM +1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | RWPE-1细胞是用单个拷贝的人乳头状瘤病毒18（HPV-18）转染从一名54岁的白人男性患者的前列腺外周区中分离出的上皮细胞而建立。细胞由密歇根州立大学国立癌症研究所保藏，可用于进一步的传染病和性传播疾病研究。当使用雄激素处理三维基质胶培养中的RWPE-1细胞，或用Matrigel或基质将细胞注射到雄性无胸腺啮齿动物体内时，RWPE-1细胞可以组织成腺泡并产生PSA。寄存人报告说，RWPE-1细胞系对乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒进行了筛查，结果呈阴性，ATCC通过PCR证实该细胞系对HPV病毒DNA序列的存在呈阳性。RWPE-1细胞还有诸多衍生系，使用Kirstin鼠肉瘤病毒（Ki-MuSV）通过Ki-ras进一步转化来自RWPE-1细胞，建立了致瘤性RWPE-2细胞系和RWPE2-W99细胞系；此外，通过N-甲基-N-亚硝基脲（MNU）处理，也从RWPE-1细胞衍生出一个模仿前列腺癌症进展的多个步骤的致瘤细胞系家族，包括WPE1-NA22、WPE1-NB14、WPE1-NB11和WPE1-NB26细胞。 |
二、RWPE-1细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、RWPE-1细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞使用专用培养体系培养，其他培养体系培养下细胞可能无法正常生长； 2.胰酶消化后，终止消化的培养基必须额外添加血清；
我们推荐使用尚恩生物 人正常前列腺上皮细胞专用培养基（产品货号：SNLM-569）作为RWPE-1(人正常前列腺上皮细胞)的专用培养基。
