一、HPAC细胞基本属性 |
|
| 细胞名称 | HPAC(人胰腺癌细胞) |
| 细胞别称 | Hpac |
| 细胞货号 | SNL-531 |
| 来源 | 胰腺癌；女性；64岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | Yes, the cells form tumors in athymic nude mice at the site of inoculation which are histologically similar to the tumor of origin Yes, the cells have a colony forming efficiency of 64% on plastic and 3.2% in agarose. |
| 培养条件 | DMEM/F12+5% FBS+2ug/mL Insulin+5ug/mL Transferrin+10ng/mL EGF+40ng/mL Hydrocortisone+1% P/S |
| 培养环境 | 空气，95% ； 二氧化碳 (CO2)，5% |
| 细胞简介 | HPAC细胞于1985年从一名患有导管源性中分化至高分化胰腺癌的女性胰腺头部切除的原发性肿瘤的裸鼠异种移植物中衍生而来。HPAC细胞增殖受到胰岛素、胰岛素样生长因子I（IGF-I）、表皮生长因子（EGF）和转化生长因子-α（TGF-α）的刺激，生长受到地塞米松和其他糖皮质激素的抑制。HPAC细胞的粗提取物含有显著浓度的肿瘤相关抗原CEA、CA125和CA19-9。在培养中，HPAC细胞形成形态不同的极性上皮细胞的单层。HPAC细胞是第一个报道表达功能性糖皮质激素受体的人胰腺癌细胞系。免疫组织化学染色显示HPAC细胞表达胰腺导管上皮标志物DU-PAN-2以及单克隆抗体HMFG1和AUA1识别的抗原。HPAC细胞可以用于3D细胞培养、癌症严禁。 |
二、HPAC细胞培养操作 |
|
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、HPAC细胞冻存操作 |
|
| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
我们推荐使用尚恩生物 人胰腺癌细胞专用培养基（产品货号：SNLM-531）作为HPAC(人胰腺癌细胞)的专用培养基。
