一、FTC-133细胞基本属性 |
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细胞名称 | FTC-133(人甲状腺癌细胞) |
细胞别称 | FTC133 |
细胞货号 | SNL-530 |
来源 | 甲状腺滤泡性癌;分化型甲状腺癌;男性;42岁 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
细胞类型 | |
生长特性 | 贴壁细胞 |
收录 | ECACC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | |
培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | FTC-133细胞是从滤泡性甲状腺癌的淋巴结转移获得的,而不是最初报道的原发性肿瘤。FTC-133细胞形态差异较大,从扁平的多边形细胞到纺锤形细胞均有。FTC-133细胞保留了分化的甲状腺细胞功能和甲状腺细胞对促甲状腺激素和局部活性生长因子的反应性,甲状腺球蛋白免疫反应性可在细胞质中显示,EGF受体免疫反应性可见于细胞膜上。FTC-133细胞具有较复杂的染色体突变以及p53突变。FTC-133、FTC-236和FTC-238均来自同一个人,即一名患有滤泡性甲状腺癌的42岁男性。ECACC的STR分析证实了这一点,STR分析无法在这些细胞系中检测到Y染色体,这是由于癌细胞不断传代过程中Y染色体可能丢失或者重排导致无法检测到。基于STR-PCR分析,这些细胞系与保藏者提供的来源相同。 |
二、FTC-133细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基; 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS; 3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层; 4.将培养瓶放入37度培养箱消化; 5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化; 6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清; 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、FTC-133细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
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