E14TG2a[暂不提供](小鼠胚胎干细胞)(暂不出售)

E14TG2a[暂不提供](小鼠胚胎干细胞)(暂不出售)

¥1,800.00

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SKU： SNL-528 分类： 标签： 规格： 1×10⁶cells/T25培养瓶
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一、E14TG2a细胞基本属性

细胞名称 E14TG2a[暂不提供](小鼠胚胎干细胞)(暂不出售)
细胞别称 ES-E14TG2a; E14TG2a; E14Tg2a; E14tg2a; E14.Tg2a
细胞货号 SNL-528
来源 胚胎；雄性；129/Ola
细胞形态 成球生长
细胞类型
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 1
致瘤性
培养条件 DMEM+15% FBS+1%NEAA+55uM β-mercaptoethanol+5ug/mL LIF+1% P/S
培养环境 空气，95% ； 二氧化碳 (CO2)，5%
细胞简介 ES-E14TG2a细胞是从小鼠胚胎中分离的胚泡衍生的胚胎干细胞系，是M.Hooper于1987年开发的几种胚胎干细胞（ES）系之一的衍生物。ES-E14TG2a细胞缺乏HGPRT（HPRT），并且对0.06mM 6-硫鸟嘌呤具有抗性，在饲养层（胚胎成纤维细胞或STO细胞）上培养时，细胞保持未分化，在没有饲养层的情况下，细胞自发分化并形成胚胎结构。当ES-E14TG2a注射到胚泡中时，这些细胞可以定植于生殖细胞系。在常规的分子基因修饰技术之后，ES-E14TG2a细胞可以用于重建小鼠胚胎。

二、E14TG2a细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；
4.将培养瓶放入37度培养箱消化；
5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；
6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、E14TG2a细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml，1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

Tips：1.该细胞缺乏 HGPRT（HPRT），并且对 0.06 mM 的 6-硫鸟嘌呤有抗性。当在饲养层（胚胎成纤维细胞或 STO 细胞）上培养时，细胞保持未分化状态。在没有饲养层的情况下，细胞自发分化并形成胚胎结构；

我们推荐使用尚恩生物 小鼠胚胎干细胞专用培养基（产品货号：SNLM-528）作为E14TG2a[暂不提供](小鼠胚胎干细胞)(暂不出售)的专用培养基。

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