一、MC38细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | MC38(小鼠结肠癌细胞) |
| 细胞别称 | MCA-38；MCA38；MCA38；MC38；MouseColon38；MurineCarcinoma-38；Colon38；Colon-38；Colon38；C38 |
| 细胞货号 | SNL-505 |
| 来源 | 结肠腺癌；C57BL/6；雌性 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | 中科院NCACC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | |
| 培养条件 | DMEM+10% FBS+1%NEAA+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | MC38细胞是由M.H.Tan等使用1, 2-二甲基肼诱导C57BL/6产生结肠腺癌后，取组织再经去除成纤维细胞后获得的结肠腺癌上皮细胞系。建系者同时还采用同样诱导方法建立了BALB/c的结肠腺癌细胞系MCA-36，但由于MCA-36细胞对胰酶敏感，因此筛选方法略有不同。MC38细胞体外传代10次、MCA-36细胞体外传代12次后均未观察到形态学变化。此外，分别在BALB/c和C57BL/6小鼠皮下再植入MCA-36和MC38纯化的肿瘤细胞后，肿瘤生长显示这些肿瘤的切片没有组织学变化。这两种细胞系目前正被用于表征局部细胞介导的对逐渐生长的可移植小鼠结肠腺癌的免疫应答。 |
二、MC38细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、MC38细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞贴壁较弱，消化时间偏短，注意控制消化时间； 2.注意控制细胞密度，过高或者过低都可能影响细胞状态，不要长时间高密度培养； 3.该细胞是松散贴壁的，贴壁部分有梭形也有圆形。存在部分悬浮圆形（不是死细胞），传代时均可收集培养，若贴壁细胞较多时可以不要悬浮的细胞。
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