一、LMH[暂不提供]细胞基本属性 |
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细胞名称 | LMH(鸡肝癌细胞)[暂不提供] |
细胞别称 | LeghornMaleHepatomacellline |
细胞货号 | SNL-494 |
来源 | 肝脏;雄性;1Y4M;White Leghorn L-M |
细胞形态 | 上皮细胞样、树突状 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | Yes, forms tumors in nude mice |
培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | LMH细胞是于1981年由北川友纪在日本东京都渡岛区Kami Ikebukuro癌症研究所建立的一种原发性肝细胞癌上皮细胞系,癌组织来源于通过二乙基亚硝胺的长期治疗的leghorn鸡肝脏中诱发的肿瘤结节。LMH细胞表达葡萄糖-6-磷酸酶和微弱的微观ATP酶活性。LMH细胞含有低水平的功能性雌激素受体,可诱导肝脏特异性载脂蛋白II(apoII)基因的表达。LMH细胞可以用于3D细胞培养和癌症研究。(注意:用于培养LMH细胞的培养容器必须包被0.1%明胶。准备容器时,用明胶溶液浸泡容器,冷藏5至10分钟,然后取出液体,以这种方式制备的容器可立即使用) |
二、LMH[暂不提供]细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基; 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS; 3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层; 4.将培养瓶放入37度培养箱消化; 5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化; 6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清; 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、LMH[暂不提供]细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞贴壁较弱,消化时间偏短,注意控制消化时间; 2.注意控制细胞密度,过高或者过低都可能影响细胞状态,不要长时间高密度培养; 3.细胞密度过高时及时传代,避免培养基变黄导致细胞脱落或者状态变差; 4.细胞冻存难度较高建议使用高血清比例冻存液配方冻存; 5.细胞对温度较敏感,不要将细胞长时间置于常温或使用较冷的培养基,PBS等处理细胞;
我们推荐使用尚恩生物 鸡肝癌细胞专用培养基(产品货号:SNLM-494)作为LMH(鸡肝癌细胞)[暂不提供]的专用培养基。