一、WEHI-3细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | WEHI-3(小鼠白血病细胞) |
| 细胞别称 | Wehi-3；WEHI3；WEHI3 |
| 细胞货号 | SNL-491 |
| 来源 | 白血病；外周血；BALB/c |
| 细胞形态 | 圆形或不规则形 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 半贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | |
| 培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | WEHI-3细胞来源于患有白血病的BALB/c小鼠外周血。WEHI-3细胞生长可以被4ng/mL LPS抑制，较高浓度的LPS可以阻断其生长，硫酸葡聚糖（30至40μg/mL）也抑制生长。WEHI-3细胞可以吞乳胶珠，但对细胞无毒性，Zymosan和BCG也可以被吞噬并阻止细胞生长。WEHI-3细胞在抗体依赖性细胞介导的毒性测试中仅表现出微弱的效应物活性。WEHI-3细胞经检测鼠痘病毒阴性，可以用于3D细胞培养、免疫系统紊乱和免疫学研究。 |
二、WEHI-3细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.轻轻吸走培养上清，留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞； 2.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清； 3.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 4.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 半贴壁细胞会附着瓶底，但贴壁不紧，轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落，不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响。 |
三、WEHI-3细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞附着瓶底生长，部分细胞悬浮生长，传代时均可收集培养，换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶； 2.圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞，如果无法判断，可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率； 3.悬浮细胞密度维持1E5-5E5/mL之间，密度过低或者过高可能会影响细胞状态；
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