一、S-180细胞基本属性 |
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细胞名称 | S-180(小鼠腹水瘤细胞) |
细胞别称 | CCRF S 180 II; S-180 II; CCRF S-180; S-180; S180; Sarcoma-180; Sarcoma 180; CCRF-180II |
细胞货号 | SNL-433 |
来源 | 腹水瘤;CFW |
细胞形态 | 圆形 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 半贴壁细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | Yes, in CFW mice. |
培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5% |
细胞简介 | S-180细胞建于1959年(Foleg,G,etal), 细胞保持了肉瘤的肿瘤原性,可用于肿瘤发生机理的体内外研究。在体外,广泛用于肿瘤花疗法的筛选试验(Cancer chemotherapy screening test)。通常情况下,S-180细胞由KM小鼠腹水传代,KM小鼠腹腔接种1.0x10^6个S-180细胞后第10天,无菌条件下抽取腹水,用PBS稀释后计数,腹腔接种传代。S-180细胞经检测鼠痘病毒阴性,可以用于3D细胞培养。 |
二、S-180细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.轻轻吸走培养上清,留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞; 2.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清; 3.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 4.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 半贴壁细胞会附着瓶底,但贴壁不紧,轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响。 |
三、S-180细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
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