一、NCI-H716 [H716]细胞基本属性 | 
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| 细胞名称 | NCI-H716 [H716](人结直肠腺癌细胞) | 
| 细胞别称 | NCIH716;H716;H-716;NCIH716 | 
| 细胞货号 | SNL-399 | 
| 来源 | 结肠腺癌;腹水转移;男性;33岁 | 
| 细胞形态 | 淋巴母细胞样(聚团生长) | 
| 细胞类型 | |
| 生长特性 | 半贴壁细胞 | 
| 收录 | ATCC | 
| 生物安全等级 | 1 | 
| 致瘤性 | Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 10(7) cells) | 
| 培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S | 
| 培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 | 
| 细胞简介 | NCI-H716细胞是1984年从一名33岁白人男性结肠腺癌患者的腹水转移病灶中分离出的,患者取样前经过5-氟尿嘧啶治疗。NCI-H716细胞含有多巴脱羧酶,与其他结直肠细胞系不同,含有内分泌分泌特征的细胞质致密核心颗粒。NCI-H716细胞不表达TAG-72或CA19-9抗原,也不产生癌胚抗原(CEA)。NCI-H716细胞可以用于3D细胞培养、癌症研究。 | 
二、NCI-H716 [H716]细胞培养操作 | 
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| 换液周期 | 2-3天 | 
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml | 
| 传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) | 
| 传代方法 | 1.轻轻吸走培养上清,留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞; 2.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清; 3.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 4.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;  | 
| 注意事项 | 半贴壁细胞会附着瓶底,但贴壁不紧,轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响。  | 
三、NCI-H716 [H716]细胞冻存操作 | 
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); | 
| 冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 | 
| 冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存  | 
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 | 
Tips:1.细胞悬浮圆形生长,偶有小聚团,部分细胞附着瓶底,传代时均可收集培养,换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶,若贴壁细胞较多活性较好时可以不要悬浮的细胞; 2.圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞,如果无法判断,可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率; 3.悬浮细胞密度维持1E5-5E5/mL之间,密度过低或者过高可能会影响细胞状态;
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	 NCI-H716 [H716](人结直肠腺癌细胞)](https://www.sunncell.com.cn/wp-content/uploads/2024/09/SNL-399-1.jpg)
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