一、LNCaP clone FGC细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | LNCaP clone FGC(人前列腺癌细胞) |
| 细胞别称 | LNCaP-Clone-FGC；LNCaP.FGC；LNCaP-FGC；LNCaPFGC；LNCaP-ATCC |
| 细胞货号 | SNL-356 |
| 来源 | 前列腺癌；左锁骨上淋巴结转移；男性；50岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | 中科院NCACC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | Yes, in soft agar.Yes, the cells are tumorigenic in nude mice. |
| 培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | 人前列腺癌细胞LNCaP clone FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离，该患者经确诊为前列腺癌转移。LNCaP clone FGC细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。LNCaP clone FGC细胞并不形成一致的单层，而是形成集落，在传代时可以反复吹吸分散。LNCaP clone FGC细胞仅仅轻轻地吸附在基底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。LNCaP clone FGC细胞生长极其缓慢，传代后48小时内不应扰动。当培养瓶包装运输后，多数LNCaP clone FGC细胞从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。 |
二、LNCaP clone FGC细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、LNCaP clone FGC细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞贴壁非常弱，聚集呈发射性贴壁生长，换液时不要直接接触细胞表面，容易造成大面积细胞漂浮； 2.细胞会使培养基快速变酸，且生长较慢，建议传代时一次性加入足量的培养基，尽量减少扰动； 3.T25瓶细胞发货大部分细胞会漂浮成团，按收货成团处理规定进行处理即可； 4.细胞对温度较为敏感，不要将细胞放置常温过久或用过冷的培养基及PBS处理细胞； 5.普通培养瓶不能使细胞较好得贴壁，建议使用多聚赖氨酸、明胶等包被的培养皿； 6.细胞传代容易成团聚集，注意尽量吹散细胞； 7.LNCAP系列存在较多衍生系，我司对STR鉴定结果保证与本细胞匹配大于0.8，但不保证匹配结果在诸多衍生系中排列第一；
我们推荐使用尚恩生物 人前列腺癌细胞专用培养基（产品货号：SNLM-356）作为LNCaP clone FGC(人前列腺癌细胞)的专用培养基。
