一、EMT6 [EMT-6]细胞基本属性 |
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细胞名称 | EMT6 [EMT-6](小鼠乳腺癌细胞) |
细胞别称 | EMT-6; ExperimentalMammaryTumour-6 |
细胞货号 | SNL-298 |
来源 | 乳腺;雌性;BALB/cCRGL |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | Yes, forms solid tumors in some sublines of BALB/c mice |
培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | EMT6细胞是从通过植入增生性乳腺肺泡结节后发生的可移植小鼠乳腺癌的雌性BALB/cCRGL小鼠乳房中分离的。植入增生性乳腺肺泡结节后发生的可移植小鼠乳腺癌所得肿瘤系(命名为KHJJ)在BALB/cKa小鼠中繁殖,并在第25次动物传代后适应组织培养并将细胞系命名为EMT,EMT6是1971年在斯坦福大学分离的EMT克隆株。EMT6细胞系可以作为肿瘤在动物体内生长,也可以在组织培养中生长。据报道,来源于肿瘤的细胞的体外培养接种效率为30%,在体外培养生长的细胞具有70%的植板效率。 |
二、EMT6 [EMT-6]细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基; 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS; 3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层; 4.将培养瓶放入37度培养箱消化; 5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化; 6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清; 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、EMT6 [EMT-6]细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞贴壁较弱,消化时间偏短,注意控制消化时间; 2.注意控制细胞密度,过高或者过低都可能影响细胞状态,不要长时间高密度培养; 3.细胞密度过高时及时传代,避免培养基变黄导致细胞脱落或者状态变差; 4.细胞生长较快,注意及时换液及传代; 5.细胞传代容易成团聚集,注意尽量吹散细胞;
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