293T/17(人胚肾细胞)(STR鉴定正确)

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一、293T/17细胞基本属性

细胞名称 293T/17(人胚肾细胞)(STR鉴定正确)
细胞别称 HEK 293T/17; 293T/17
细胞货号 SNL-248
来源 胚肾;5型腺病毒及SV40转化;女性;胚胎
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 转化细胞系
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 2
致瘤性
培养条件 DMEM+10% FBS+1% P/S
培养环境 空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%
细胞简介 293T/17细胞是293T细胞株的衍生株,293T是293 [HEK-293]细胞株插入了SV40 T-antigen的温度敏感基因形成的高转衍生株。293T细胞进行克隆,检测pBND和pZAP载体,得到一株能生成高滴度感染逆转录病毒的衍生株293T/17细胞。293T/17细胞持续表达猿病毒40(SV40)大T抗原,而因其高转染能力筛选到17号克隆。293T/17细胞用pCRIPenv-和pCRIPgag-2载体转染得到ANJOU65细胞株,ANJOU65细胞再用pCRIPgag-2和pGPT2E载体转染得到亲宅性外壳表达细胞株BOSC 23。ANJOU65细胞用携带gpt抗性基因的pCRIPAMgag载体转染得到Bing双向性表达包装细胞株。

二、293T/17细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、293T/17细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞贴壁较弱,消化时间偏短,注意控制消化时间; 2.T25瓶细胞发货易漂浮成团,收货若成团按收货处理规定进行; 3.细胞培养时可能会有部分黑点,属正常现象,具体原因参见培养操作说明2、3条;

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293T/17(人胚肾细胞)(STR鉴定正确)收货处理方式

293T/17(人胚肾细胞)(STR鉴定正确)培养操作说明

293T/17(人胚肾细胞)(STR鉴定正确)售后规定

293T/17(人胚肾细胞)(STR鉴定正确)STR分型结果及匹配其细胞库信息
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细胞基因分型图谱
293T/17(人胚肾细胞)(STR鉴定正确)细胞基因分型图谱