15P-1(小鼠睾丸上皮细胞)

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SKU: SNL-246 分类: 标签: 收录: ATCC培养基: DMEM来源: 雄;6月龄 睾丸规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶

一、15P-1细胞基本属性

细胞名称 15P-1(小鼠睾丸上皮细胞)
细胞别称
细胞货号 SNL-246
来源 睾丸;支持细胞;雄性;C57BL/6 x DBA/2;6月龄
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 肿瘤细胞
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 2
致瘤性
培养条件 DMEM+10% FBS+1% P/S
培养环境 37℃;5% CO2;饱和湿度
细胞简介 15P-1细胞是从在生精上皮细胞中表达多瘤病毒(PyLT)的大T蛋白的转基因小鼠睾丸细胞中建立的。15P-1细胞表现出支持细胞的特征,包括Wilms肿瘤(WT1)基因和Steel基因的转录。15P-1细胞通过胶乳珠的吞噬和死亡细胞的处理可以证实其具有吞噬活性,与生殖细胞的相互作用可以增强15P-1细胞的吞噬活性。在二倍体减数分裂前生殖细胞与表达精蛋白(Prm-1)基因的单倍体精细胞的共培养中,细胞可以进行减数分裂和减数分裂后的分化。当从未成熟的9日龄动物中移植的睾丸细胞与15P-1细胞共培养时,在第一次减数分裂开始之前,睾丸细胞可以产生具有圆形精细胞形态的单倍体细胞四分体,并启动精蛋白转录。15P-1细胞分泌具有广谱抗菌活性的蛋白酶敏感物质,在富含圆形精细胞和神经生长因子的组分存在下,15P-1培养基中抗菌物质的活性增加10倍至50倍。支持细胞和15P-1细胞都可以表达KL蛋白,一种Kit受体的配体。15P-1细胞可以用于3D细胞培养。

二、15P-1细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、15P-1细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

我们推荐使用尚恩生物 小鼠睾丸上皮细胞专用培养基(产品货号:SNLM-246)作为15P-1(小鼠睾丸上皮细胞)的专用培养基。

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15P-1(小鼠睾丸上皮细胞)培养操作说明

15P-1(小鼠睾丸上皮细胞)售后规定