AML-12(小鼠正常肝细胞)

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SKU: SNL-242 分类: 标签: 收录: ATCC规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶

一、AML-12细胞基本属性

细胞名称 AML-12(小鼠正常肝细胞)
细胞别称 AML-12; AML12; AlphaMouseLiver12
细胞货号 SNL-242
来源 肝;自发永生;CD-1 line MT42 transgenic;3月龄
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 正常细胞
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 1
致瘤性 No, the cells do not form colonies or grow in soft agar.No, the cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice
培养条件 DMEM/F12+10% FBS+10ug/mL Insulin+5.5ug/mL Transferrin+5ng/mL Selenium+50ng/mL Dexamethasone+1% P/S
培养环境 37℃;5% CO2;饱和湿度
细胞简介 AML12(alpha mouse liver 12)细胞是从3个月大的转染人TGF-α基因的小鼠(CD1-MT42品系)小鼠的正常肝脏中分离的肝细胞。通过电子显微镜观察发现,AML12细胞表现出典型的肝细胞特征,如过氧化物酶体和胆管样结构。AML12细胞保持表达血清蛋白(白蛋白、α1抗胰蛋白酶和转铁蛋白)和缝隙连接蛋白(连接蛋白26和32)高水平mRNA的能力,并且仅含有乳酸脱氢酶同工酶5。AML12细胞表达高水平的人TGF-α和低水平的小鼠TGF-α。AML12细胞肝脏特异性蛋白的表达随着培养时间的推移而降低,但可以通过在无血清培养基中培养细胞而重新激活。AML12细胞可以用于3D细胞培养、高通量筛选、毒理学研究,也是一种合适的转染宿主。

二、AML-12细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、AML-12细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞培养时黑点可能会比较多,具体原因参见培养操作说明2、3条; 2.细胞生长偏慢,注意控制传代密度不要过低;

我们推荐使用尚恩生物 小鼠正常肝细胞专用培养基(产品货号:SNLM-242)作为AML-12(小鼠正常肝细胞)的专用培养基。

AML-12(小鼠正常肝细胞)收货处理方式

AML-12(小鼠正常肝细胞)培养操作说明

AML-12(小鼠正常肝细胞)售后规定