hFOB1.19(人SV40转染成骨细胞)[暂不提供]

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SKU: SNL-217 分类: 标签: 收录: 中科院NCACC培养基: DMEM/F12+0.3mg/mL G418+10% FBS+1% P/S来源: 成骨细胞;SV40转化;条件永生;女性;胎儿规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶

一、hFOB1.19[暂不提供]细胞基本属性

细胞名称 hFOB1.19(人SV40转染成骨细胞)[暂不提供]
细胞别称 hFOB1.19;hFOB
细胞货号 SNL-217
来源 成骨细胞;SV40转化;条件永生;女性;胎儿
细胞形态 梭形细胞
细胞类型 转化细胞系
生长特性 贴壁细胞
收录 中科院NCACC
生物安全等级 2
致瘤性
培养条件 DMEM/F12+0.3mg/mL G418+10% FBS+1% P/S
培养环境 37℃;5% CO2;饱和湿度
细胞简介 hFOB1.19细胞是在0.6mg/mL新霉素G418存在下,用温度敏感的表达载体pUCSVisA58转染自然流产的胎儿四肢组织建立的,在33.5℃下细胞分裂很快,而在限制温度39.5℃下细胞极少分裂或不分裂。 hFOB1.19细胞具有分化为表达造骨细胞表型的成熟造骨细胞的能力。hFOB1.19细胞提供了一个同质化的快速增殖模型系统,用于研究正常人造骨细胞的分化、造骨细胞生理和激素、生长因子和对造骨细胞的功能及分化有影响的细胞因子。

二、hFOB1.19[暂不提供]细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、hFOB1.19[暂不提供]细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞是转染永生化的,需要添加G418筛选并在33.5度环境下培养,环境不适或者未添加筛选抗生素的细胞可能会失去永生特性,无法增殖;

我们推荐使用尚恩生物 人SV40转染成骨细胞专用培养基(产品货号:SNLM-217)作为hFOB1.19(人SV40转染成骨细胞)[暂不提供]的专用培养基。

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hFOB1.19(人SV40转染成骨细胞)[暂不提供]STR分型结果及匹配其细胞库信息
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细胞基因分型图谱
hFOB1.19(人SV40转染成骨细胞)[暂不提供]细胞基因分型图谱