一、BEAS-2B细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | BEAS-2B(人正常肺支气管上皮细胞) |
| 细胞别称 | Beas-2B；BEAS2B；BEAS2B；Beas2B；BronchialEpitheliumtransformedwithAd12-SV402B |
| 细胞货号 | SNL-203 |
| 来源 | 肺支气管；上皮细胞；Ad12-SV40转化；男性 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 转化细胞系 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 2 |
| 致瘤性 | No, the cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice |
| 培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | BEAS-2B细胞是从一位非癌男性个体的正常人支气管上皮病理切片分离出的上皮细胞。BEAS-2B细胞通过腺病毒12-SV40病毒杂交病毒感染并克隆，BEAS-2B细胞保留了对血清反应进行鳞关分化的能力，可以用于筛选诱导或影响分化及致癌的化学或生物制剂，还可以用于肺炎球菌感染机制的研究。BEAS-2B细胞角蛋白及SV40抗原染色阳性。BEAS-2B细胞在汇合前对细胞进行继代培养是必要的，因为汇合培养物迅速经历鳞状细胞终末分化。 |
二、BEAS-2B细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、BEAS-2B细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.该细胞可以在使用纤维连接蛋白、牛I型胶原和牛血清白蛋白包被培养瓶后使用BEGM无血清培养体系培养，亦可按我方条件使用常规TC处理培养瓶和DMEM含血清培养体系培养（我司暂不提供BEGM培养环境下的细胞）； 2.细胞采用包被+BEGM无血清培养体系时形态偏卵石样，采用DMEM含血清培养会略微呈梭形形态，具体细胞功能也会有部分改变； 3.我司更换该细胞培养体系基于文献资料，旨在降低该细胞培养传代难度以促进细胞共享，我司对细胞正确性及传代培养能力负责，不对细胞培养体系变化导致的形态及实验差异负责，如有需要建议参考文献资料并采用适合实验内容的培养环境； 4.细胞培养时可能有部分黑点，具体原因参见培养操作说明2、3条。
我们推荐使用尚恩生物 人正常肺支气管上皮细胞专用培养基（产品货号：SNLM-203）作为BEAS-2B(人正常肺支气管上皮细胞)的专用培养基。
