HT-22(小鼠海马神经元细胞)

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HT-22细胞作为生长迅速的小鼠海马神经元细胞，其增殖期对培养基需求显著高于普通细胞。由于该细胞代谢活跃且贴壁能力较弱，高密度时营养消耗加速，若培养基体积不足（如T25瓶低于10ml），易导致代谢废物堆积、pH失衡及细胞提前老化。建议维持T25瓶10-12ml、10cm皿12-15ml的培养基量，并在密度达60%后增加换液频率，以稳定渗透压并支持HT-22细胞的正常增殖与功能（如谷氨酸毒性研究）

HT-22小鼠海马神经元细胞因贴壁脆弱，吹打重悬需采用低吸附枪头（如宽口设计），以1mL移液器3-4档吸力沿培养皿侧壁画圈吹打3-5次，避免垂直冲击细胞层。吹打时气泡产生会直接损伤细胞膜，导致后续贴壁失败或增殖迟缓，建议预冷PBS润洗后加入含10% FBS的培养基作为缓冲液。若HT-22细胞成团，可静置2分钟待其自然分散，避免反复吹打加剧机械损伤。

HT-22小鼠海马神经元细胞因其快速增殖特性，推荐在80%密度时传代以避免过度生长导致的营养竞争和代谢压力。若需培养高密度HT-22细胞，需将换液频率提升至每日一次（80%以上密度）或隔日一次（60-80%密度），确保培养基pH稳定（7.2-7.4）且含足量葡萄糖（4.5g/L DMEM）。实验显示，HT-22细胞密度超过90%时易出现胞内ROS累积和凋亡率上升，影响后续实验重复性，因此传代前需结合显微镜观察细胞形态（饱满梭形为佳）。