一、SK-N-BE(2)-C细胞基本属性 |
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细胞名称 | SK-N-BE(2)-C(人神经母细胞瘤细胞)[暂不提供] |
细胞别称 | SK-N-BE(2)C;SK-N-BE-2c;SK-N-BE2(c);SK-N-BE(2C);SK-N-BE(2c);SK-N-BE2C;SK_N_BE2C;SKNBE2C;SKNBE(2c);BE(2)-C;BE(2)C;Be(2)C;BE2-C;BE2_C;Be2-C;BE2C;Be2C |
细胞货号 | SNL-190 |
来源 | 神经母细胞瘤;骨髓转移;男性;2岁2个月 |
细胞形态 | 神经母细胞样 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | Yes, an inoculum of 1×10^7 cells produced tumors in cortisonized hamster cheek pouches with 18% frequency. |
培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | SK-N-BE(2)-C细胞是SK-N-BE(2)的克隆亚系,于1972年从一位多次化疗及放疗的2岁2个月扩散性神经母细胞瘤患男性儿骨髓穿刺物中建立的。据报道,SK-N-BE(2)-C细胞在神经元酶表达方面具有多潜能,并显示出将酪氨酸转化为多巴胺较高的能力。SK-N-BE(2)-C细胞生长为扁平的神经母细胞群,偶尔有细小的细胞突起(神经突),倾向于聚集生长,与母系不同的是SK-N-BE(2)-C细胞通常不会分离和浮动。通过短串联重复序列(STR)-PCR分析无法在该细胞系中检测到Y染色体,是由于癌细胞系的遗传不稳定性增加,Y染色体可能被重新排列或丢失,导致缺乏检测,这是很常见的现象。SK-N-BE(2)-C细胞可以用于3D细胞培养、免疫学研究和神经科学研究。 |
二、SK-N-BE(2)-C细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基; 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS; 3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层; 4.将培养瓶放入37度培养箱消化; 5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化; 6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清; 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、SK-N-BE(2)-C细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞贴壁较弱,消化时间偏短,注意控制消化时间; 2.细胞传代容易成团聚集,注意尽量吹散细胞;细胞生长偏慢,注意控制细胞密度不要过低; 3.细胞培养时黑点可能会比较多,具体原因参见培养操作说明2、3条
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