一、SK-N-BE(2)-C细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | SK-N-BE(2)-C(人神经母细胞瘤细胞) |
| 细胞别称 | SK-N-BE(2)C; SK-N-BE-2c; SK-N-BE2(c); SK-N-BE(2C); SK-N-BE(2c); SK-N-BE2C; SK_N_BE2C; SKNBE2C; SKNBE(2c); BE(2)-C; BE(2)C; Be(2)C; BE2-C; BE2_C; Be2-C; BE2C; Be2C |
| 细胞货号 | SNL-190 |
| 来源 | 神经母细胞瘤；骨髓转移；男性；2岁2个月 |
| 细胞形态 | 神经母细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | Yes, an inoculum of 1×10^7 cells produced tumors in cortisonized hamster cheek pouches with 18% frequency. |
| 培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 空气，95% ； 二氧化碳 (CO2)，5% |
| 细胞简介 | SK-N-BE(2)-C细胞是SK-N-BE(2)的克隆亚系，于1972年从一位多次化疗及放疗的2岁2个月扩散性神经母细胞瘤患男性儿骨髓穿刺物中建立的。据报道，SK-N-BE(2)-C细胞在神经元酶表达方面具有多潜能，并显示出将酪氨酸转化为多巴胺较高的能力。SK-N-BE(2)-C细胞生长为扁平的神经母细胞群，偶尔有细小的细胞突起（神经突），倾向于聚集生长，与母系不同的是SK-N-BE(2)-C细胞通常不会分离和浮动。通过短串联重复序列（STR）-PCR分析无法在该细胞系中检测到Y染色体，是由于癌细胞系的遗传不稳定性增加，Y染色体可能被重新排列或丢失，导致缺乏检测，这是很常见的现象。SK-N-BE(2)-C细胞可以用于3D细胞培养、免疫学研究和神经科学研究。 |
二、SK-N-BE(2)-C细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、SK-N-BE(2)-C细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞贴壁较弱，消化时间偏短，注意控制消化时间； 2.细胞传代容易成团聚集，注意尽量吹散细胞；细胞生长偏慢，注意控制细胞密度不要过低； 3.细胞培养时黑点可能会比较多，具体原因参见培养操作说明2、3条
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