一、RPMI 8226细胞基本属性 |
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细胞名称 | RPMI 8226(人多发性骨髓瘤细胞) |
细胞别称 | RPMI8226;RPMI.8226;RPMI8226;RPMIno8226;8226;RPMI8226/S;RPMI-8226S;RPMI8226/S;8226/S;RoswellParkMemorialInstitute8226;GM02132;GM2132;GM2132;Simpson |
细胞货号 | SNL-181 |
来源 | 浆细胞骨髓瘤;B淋巴细胞;男性;61岁 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 半贴壁细胞 |
收录 | 中科院NCACC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | |
培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | RPMI 8226细胞是1966年从一名61岁男性浆细胞瘤患者的外周血中分离的B淋巴细胞。RPMI 8226细胞可以产生免疫球蛋白轻链,没有证据表明细胞能产生重链(细胞质型或分泌型)。RPMI 8226细胞可用于3D细胞培养、免疫学和免疫系统研究,也是一种合适的转染宿主。 |
二、RPMI 8226细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.轻轻吸走培养上清,留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞; 2.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清; 3.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 4.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 半贴壁细胞会附着瓶底,但贴壁不紧,轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响。 |
三、RPMI 8226细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞半贴壁圆形生长,部分悬浮圆形,传代时均可收集培养,换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶,若贴壁细胞较多活性较好时可以不要悬浮的细胞; 2.传代有部分细胞碎片可以换液后用PBS润洗细胞清除,使用的PBS需要恢复到室温,加入时不要冲到细胞面,润洗尽量轻柔; 3.该细胞生长偏慢,比较容易死亡,不建议没有相关细胞操作经验的客户单独培养该细胞; 4.细胞培养时黑点可能会比较多,属于正常情况,黑点较多时及时换液清除即可,具体原因参见培养操作说明2、3条; 5.冻存细胞复苏后需要较长时间才能恢复正常生长状态;
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