HK-2(人肾小管上皮细胞)
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¥1,500.00

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货号： SNL-165 分类： 标签： 收录： ATCC培养基： DMEM/F12+10% FBS+1% P/S来源： 肾小管；上皮细胞；HPV16转化；男性；成年规格： 1×10⁶cells/T25培养瓶
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一、HK-2细胞基本属性

细胞名称 HK-2(人肾小管上皮细胞)
细胞别称 Hk-2；HK2；HumanKidney-2
细胞货号 SNL-165
来源 肾小管；上皮细胞；HPV16转化；男性；成年
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 转化细胞系
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 2
致瘤性
培养条件 DMEM/F12+10% FBS+1% P/S
培养环境 37℃；5% CO2；饱和湿度
细胞简介 HK-2细胞属源于正常肾的近曲小管细胞，通过导入HPV-16 E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16 E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7转染外生包装细胞Psi-2；Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317，最后将PA317细胞产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性，但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示，HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实，HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。HK-2细胞保留了指示分化良好的PTCs的表型，细胞碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶、亮氨酸氨基肽酶、酸性磷酸酶、细胞角蛋白、α3、β1整合素和纤维连接蛋白呈阳性，因子VIII相关抗原、6.19抗原和CALLA内肽酶呈阴性。HK-2细胞还保留了近端肾小管上皮的功能特征，如Na+依赖性/根皮苷敏感性糖转运和腺苷酸环化酶对甲状旁腺的反应性，但对抗利尿激素的反应性。HK-2细胞能够进行糖异生，其制造和储存糖原的能力证明了这一点。HK-2细胞是贴壁依赖性的，不会在甲基纤维素、软琼脂或悬浮液中生长。HK-2细胞可以重现用新鲜分离的PTC获得的实验结果。HK-2细胞在毒理学研究中有应用。

二、HK-2细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；
4.将培养瓶放入37度培养箱消化；
5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；
6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、HK-2细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml，1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

Tips：1.细胞培养时黑点可能会比较多，具体原因参见培养操作说明2、3条； 2.细胞生长偏慢，形态各异，注意控制传代密度不要过低，否则细胞生长会极慢；

我们推荐使用尚恩生物 人肾小管上皮细胞专用培养基（产品货号：SNLM-165）作为HK-2(人肾小管上皮细胞)的专用培养基。

HK-2(人肾小管上皮细胞)收货处理方式

HK-2(人肾小管上皮细胞)培养操作说明

HK-2(人肾小管上皮细胞)售后规定

HK-2(人肾小管上皮细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息
HK-2(人肾小管上皮细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息

细胞基因分型图谱
HK-2(人肾小管上皮细胞)细胞基因分型图谱

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HK-2细胞出现空泡是否影响实验？如何区分正常与异常状态？

HK-2（人肾小管上皮细胞）胞质内的空泡多为正常生理现象，尤其在细胞代谢活跃时常见，无需特殊处理。若空泡伴随以下异常表现，需警惕：① ?生长速度显著减缓?（如一周无法传代）；② ?形态异常?（如镰刀状或不规则变形）；③ ?拉丝细胞比例增加。此时建议：提高血清浓度至15%-20%（不超过20%），或更换高质量胎牛血清。正常空泡在传代后密度恢复时会自然减少，培养时优先使用DMEM/F12+10% FBS培养基并避免频繁观察干扰微环境。

如何有效提升HK-2细胞的增殖速度？关键操作如何优化？

HK-2（人肾小管上皮细胞）生长缓慢时，需针对性调整培养策略：① ?控制传代密度：接种密度需＞2×10? cells/ml，传代比例建议1:2-1:4，避免因密度过低导致停滞；② ?优化培养基：优先使用含10%-15%优质胎牛血清的DMEM/F12培养基，血清批次需稳定；③ ?减少操作干扰：每48小时观察一次，避免频繁换液或吹打。此外，复苏后需静置24小时再换液，确保细胞充分贴壁恢复。

HK-2细胞培养中黑点增多如何鉴别与处理？关键应对策略是什么？

HK-2（人肾小管上皮细胞）培养时背景黑点多为代谢产物或细胞碎片，通常不影响增殖。正常处理策略：① 换液时用室温PBS轻柔润洗2-3次，沿瓶壁缓慢加入避免冲刷贴壁细胞；②传代时可降低离心转速至800rpm离心3分钟，减少碎片混入。异常情况需警惕：若黑点伴随细胞变形（镰刀状）、贴壁减少或死亡，可能为支原体污染或操作损伤。建议：① 检测支原体为阳性时，添加支原体清除剂处理1-2周；② 更换高质量胎牛血清。日常培养需控制传代密度＞2×10? cells/ml，并减少频繁观察以维持微环境稳定。