HK-2(人肾小管上皮细胞)

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SKU: SNL-165 分类: 标签: 收录: ATCC培养基: DMEM/F12来源: 肾小管;上皮细胞;HPV16转化;男性规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶

一、HK-2细胞基本属性

细胞名称 HK-2(人肾小管上皮细胞)
细胞别称 Hk-2; HK2; Human Kidney-2
细胞货号 SNL-165
来源 肾小管;上皮细胞;HPV16转化;男性;成年
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 转化细胞系
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 2
致瘤性
培养条件 DMEM/F12+10% FBS+1% P/S
培养环境 空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%
细胞简介 HK-2细胞属源于正常肾的近曲小管细胞,通过导入HPV-16 E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16 E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7转染外生包装细胞Psi-2;Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317,最后将PA317细胞产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示,HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实,HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。HK-2细胞保留了指示分化良好的PTCs的表型,细胞碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶、亮氨酸氨基肽酶、酸性磷酸酶、细胞角蛋白、α3、β1整合素和纤维连接蛋白呈阳性,因子VIII相关抗原、6.19抗原和CALLA内肽酶呈阴性。HK-2细胞还保留了近端肾小管上皮的功能特征,如Na+依赖性/根皮苷敏感性糖转运和腺苷酸环化酶对甲状旁腺的反应性,但对抗利尿激素的反应性。HK-2细胞能够进行糖异生,其制造和储存糖原的能力证明了这一点。HK-2细胞是贴壁依赖性的,不会在甲基纤维素、软琼脂或悬浮液中生长。HK-2细胞可以重现用新鲜分离的PTC获得的实验结果。HK-2细胞在毒理学研究中有应用。

二、HK-2细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、HK-2细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞培养时黑点可能会比较多,具体原因参见培养操作说明2、3条; 2.细胞生长偏慢,形态各异,注意控制传代密度不要过低,否则细胞生长会极慢;

我们推荐使用尚恩生物 人肾小管上皮细胞专用培养基(产品货号:SNLM-165)作为HK-2(人肾小管上皮细胞)的专用培养基。

HK-2(人肾小管上皮细胞)收货处理方式

HK-2(人肾小管上皮细胞)培养操作说明

HK-2(人肾小管上皮细胞)售后规定

HK-2细胞STR分型结果及匹配其细胞库信息

细胞基因分型图谱