一、H22细胞基本属性 |
|
| 细胞名称 | H22(小鼠肝癌细胞) |
| 细胞别称 | Hepatoma-22; Hepatoma 22 |
| 细胞货号 | SNL-157 |
| 来源 | 肝癌；C3HA |
| 细胞形态 | 圆形/上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | 武大典藏中心CCTCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | Yes, in Balb/c and KuMing mice. |
| 培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 空气，95% ； 二氧化碳 (CO2)，5% |
| 细胞简介 | H22细胞分离自小鼠腹水，1952年前苏联医学科学院肿瘤研究所以C3HA小鼠诱发的H22肝癌实体瘤的瘤细胞悬液，昆明种小鼠皮下移植后，转腹水瘤。经检测，该瘤株在Km小鼠、615小鼠、C57BL/6小鼠、BALB/C小鼠体内可以形成实体瘤和腹水瘤。尚恩生物提示：细胞本身是贴壁细胞，因为注射腹水后才变成悬浮细胞，所以体外传代次数较多的细胞会恢复贴壁状态。如果需要体外传代多次，后期建议按照贴壁细胞处理。 |
二、H22细胞培养操作 |
|
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、H22细胞冻存操作 |
|
| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.该细胞为贴壁细胞，由于腹水传代后才会悬浮生长，因此腹水传代过的细胞在体外培养时贴壁会逐渐变多变紧，所以细胞实际贴壁情况可能会有一定程度变化； 2.有部分细胞悬浮生长时，可以视贴壁细胞多少及状态决定是否保留悬浮细胞；
我们推荐使用尚恩生物 小鼠肝癌细胞专用培养基（产品货号：SNLM-157）作为H22(小鼠肝癌细胞)的专用培养基。
