一、H9细胞基本属性 |
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细胞名称 | H9(人T淋巴细胞系) |
细胞别称 | HTcloneH9;HT(H9);H9;H-9 |
细胞货号 | SNL-143 |
来源 | 皮肤T淋巴瘤细胞;男性;53岁 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | Yes, in nude mice inoculated subcutaneously with 10(7) cells |
培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | H9细胞是HuT 78细胞的克隆系,来源于一名53岁的白人男性Sezary综合征患者,建立H9克隆是为了进行HIV-1复制,并已用于从获得性免疫缺陷综合征(AIDS)和艾滋病前期患者的血液中分离和增殖HIV-1。H9细胞表面带有CD3、CD4标记,细胞表达IL2。研究表明,H9细胞对人体免疫缺陷病毒(HIV-1)敏感,可用于检测、分离和增殖HIV-1,也可用于其它人类T细胞病毒的研究。 |
二、H9细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清; 2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 3.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 部分悬浮细胞会附着瓶底,轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、H9细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80 度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20 度静置 2h 后转入-80 度过夜,第二天转入液氮保存。 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞悬浮生长,形态各异,偶有小聚团,部分细胞会附着瓶底; 2.圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞,如果无法判断,可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率; 3.悬浮细胞密度维持1E5-5E5/mL之间,密度过低或者过高可能会影响细胞状态;
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