一、Neuro-2a细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | Neuro-2a(小鼠脑神经瘤细胞) |
| 细胞别称 | NEURO-2A；Neuro2a；Neuro2a；Neuro2A；N-2a；N2a；N2A；Nb2a；NB2a |
| 细胞货号 | SNL-134 |
| 来源 | 神经母细胞瘤；雄性； A/J |
| 细胞形态 | 神经细胞样、阿米巴样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | |
| 培养条件 | EMEM(MEM+NEAA)+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞是由R·J·Klebe和F·H·Ruddle自A/J小鼠大脑组织自生肿瘤建立的具有神经元和变形干细胞形态的小鼠成神经细胞。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞产生大量微管蛋白，此蛋白在神经细胞中起应答轴浆流动的收缩系统作用，细胞也表达乙酰胆碱酯酶基因。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞能够分化成各种类型的神经元。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞可以用于3D细胞培养、高通量筛选、神经科学研究、毒理学研究。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞已用于研究长春碱沉淀微管蛋白的机制、GTP与分离蛋白结合的动力学、体内微管的周转以及微管蛋白合成和组装。世界动物卫生组织（OIE）将这些细胞用于狂犬病的常规诊断。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞经检测鼠痘病毒呈阴性。 |
二、Neuro-2a细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、Neuro-2a细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞多角形或圆形贴壁，有触角，消化时易断裂行成黑色颗粒，细胞培养时黑点可能会比较多，具体原因参见培养操作说明2、3条； 2. 不建议使用高糖DMEM培养，可能会导致部分细胞形态改变，生长速度变慢；
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