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RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)

¥980.00

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货号: SNL-112 分类: 收录: ATCC培养基: DMEM+10% FBS+1% P/S来源: 单核巨噬细胞白血病;雄性;BALB/c;成年规格: 1×10⁶Cells/T25培养瓶或1mL冻存管

一、RAW 264.7细胞基本属性

细胞名称 RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)
细胞别称 RAW264;RAW2647;RAW264.7;RAW-264.7;Raw264.7;Raw264.7
细胞货号 SNL-112
来源 单核巨噬细胞白血病;雄性;BALB/c;成年
细胞形态 不规则形(圆形或多角形)
细胞类型
生长特性 半贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 2
致瘤性
培养条件 DMEM+10% FBS+1% P/S
培养环境 37℃;5% CO2;饱和湿度
细胞简介 RAW 264.7细胞是从Abelson小鼠白血病病毒(MuLV)诱导的肿瘤中建立的雄性小鼠巨噬细胞细胞系,Raschke等人于1976年首次报道了该细胞系。RAW 264.7细胞sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。RAW 264.7细胞不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。根据Janet W.Hartley博士在2008年发表的一项研究,RAW 264.7细胞被证明表达生态性和多向性MuLV,并且使用XC噬斑试验对病毒复制呈阳性。RAW 264.7细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖,并且可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导RAW 264.7细胞分解红血球,但对肿瘤靶细胞无作用。RAW 264.7细胞易于繁殖,DNA转染效率高,对RNA干扰敏感,并支持小鼠诺如病毒的复制,可以用于3D细胞培养、免疫系统紊乱和免疫学研究,也是一种合适的转染宿主。

二、RAW 264.7细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.轻轻吸走培养上清,留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞;
2.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清;
3.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
4.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 半贴壁细胞会附着瓶底,但贴壁不紧,轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。
建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响。

三、RAW 264.7细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞半贴壁圆形或多角形生长,部分悬浮圆形,传代时均可收集培养,换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶,若贴壁细胞较多活性较好时可以不要悬浮的细胞; 2.该细胞对胰酶比较敏感,胰酶消化后细胞形态会更多梭形,贴壁变紧,传代不建议使用胰酶消化该细胞; 3.该细胞生长较快,培养基消耗较快,培养时注意密切关注细胞状态,密度较高、培养基有变黄趋势时及时换液避免细胞状态变差;

我们推荐使用尚恩生物 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞专用培养基(产品货号:SNLM-112)作为RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)的专用培养基。

RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)收货处理方式

RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)培养操作说明

RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)售后规定

RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息
RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息

细胞基因分型图谱
RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)细胞基因分型图谱

RAW 264.7细胞培养中出现少量分化细胞是否正常?

在RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞培养中,少量短梭形或多角形分化细胞属于正常现象(通常≤10%),主要因细胞对环境敏感(如机械刺激或密度过高)自发形成。可通过差异贴壁法优化:1轻柔吹打:利用未分化细胞贴壁松散的特性,用巴氏管或1mL枪头轻吹表面,仅收集圆形未分化细胞;2控制密度:维持传代密度70%-80%,避免高密度诱发更多分化;3避免胰酶:改用PBS冲洗或细胞刮刀,减少分化诱导。分化细胞贴壁牢固,无需强制剥离,定期筛选即可维持稳定状态。

RAW 264.7细胞为何禁用胰酶消化?

RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞对胰酶的敏感性极高,接触后易触发不可逆分化,表现为伪足延伸、贴壁增强,导致后续实验数据偏差。推荐采用物理刮取法或轻柔吹打法传代:预冷PBS润洗后,用细胞刮单向轻刮(避免反复操作),或巴氏管吹打未分化圆形细胞(密度80%-90%时最易脱落)。分化的细胞贴壁牢固,需弃用;未分化细胞离心重悬后接种,并控制传代间隔≤3天,以维持稳定状态。

RAW 264.7细胞生长速度过快时该如何控制传代时机?

RAW 264.7细胞作为小鼠单核巨噬细胞白血病细胞系,具有倍增时间短(22-26小时)的特性,若密度超过80%未及时传代,易导致细胞堆叠、分化或状态恶化。建议每日显微镜下观察,当细胞呈现紧密贴壁且汇合度达70%-80%时,采用无酶刮取法传代(避免胰酶诱导分化),并控制传代比例为1:3至1:6,以维持最佳生长活性。若延迟传代,分化细胞贴壁牢固,可能影响后续实验数据稳定性。