一、KATO III细胞基本属性 |
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细胞名称 | KATO III(人胃癌细胞) |
细胞别称 | KatoIII;Kato-III;KATO-III;KATOIII;KatoIII;KATO3;JTC-28;JapaneseTissueCulture-28 |
细胞货号 | SNL-105 |
来源 | 胃印戒细胞腺癌;胸腔积液转移;男性;55岁 |
细胞形态 | 球形 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 半贴壁细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | Yes, in cheek pouches of anti thymocyte serum treated hamsters.No, in nude mice. |
培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | KATO III细胞是从一名55岁亚洲男性胃癌患者的胸腔积液中建立的,转移病灶包括道格拉斯陷凹、腋下淋巴结、胸腔积液、锁骨上淋巴结等。KATO III细胞是半贴壁半悬浮细胞,部分贴壁部分悬浮,可以在抗胸腺细胞血清处理的仓鼠面颊袋和裸鼠成瘤。KATO III细胞可以用于3D细胞培养和癌症研究。 |
二、KATO III细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.轻轻吸走培养上清,留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞; 2.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清; 3.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 4.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 半贴壁细胞会附着瓶底,但贴壁不紧,轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响。 |
三、KATO III细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞半贴壁圆形生长,大量悬浮圆形,传代时均可收集培养,换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶; 2.传代有部分细胞碎片可以换液后用PBS润洗细胞清除,使用的PBS需要恢复到室温,加入时不要冲到细胞面,润洗尽量轻柔; 3.该细胞圆形较多,注意控制细胞传代密度。可能会有少量细胞贴壁较牢而吹不下来,这部分细胞可以不要,如果想收集全部细胞,贴壁牢固的细胞可以消化下来收集;
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