一、KATO III细胞基本属性 |
|
| 细胞名称 | KATO III(人胃癌细胞) |
| 细胞别称 | KatoIII；Kato-III；KATO-III；KATOIII；KatoIII；KATO3；JTC-28；JapaneseTissueCulture-28 |
| 细胞货号 | SNL-105 |
| 来源 | 胃印戒细胞腺癌；胸腔积液转移；男性；55岁 |
| 细胞形态 | 球形(圆形为主，悬浮或附着瓶底) |
| 细胞类型 | |
| 生长特性 | 半贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | Yes, in cheek pouches of anti thymocyte serum treated hamsters.No, in nude mice. |
| 培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | KATO III细胞是从一名55岁亚洲男性胃癌患者的胸腔积液中建立的，转移病灶包括道格拉斯陷凹、腋下淋巴结、胸腔积液、锁骨上淋巴结等。KATO III细胞是半贴壁半悬浮细胞，部分贴壁部分悬浮，可以在抗胸腺细胞血清处理的仓鼠面颊袋和裸鼠成瘤。KATO III细胞可以用于3D细胞培养和癌症研究。 |
二、KATO III细胞培养操作 |
|
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.轻轻吸走培养上清，留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞； 2.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清； 3.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 4.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 半贴壁细胞会附着瓶底，但贴壁不紧，轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落，不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响。 |
三、KATO III细胞冻存操作 |
|
| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞半贴壁圆形生长，大量悬浮圆形，传代时均可收集培养，换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶； 2.传代有部分细胞碎片可以换液后用PBS润洗细胞清除，使用的PBS需要恢复到室温，加入时不要冲到细胞面，润洗尽量轻柔； 3.该细胞圆形较多，注意控制细胞传代密度。可能会有少量细胞贴壁较牢而吹不下来，这部分细胞可以不要，如果想收集全部细胞，贴壁牢固的细胞可以消化下来收集；
我们推荐使用尚恩生物 人胃癌细胞专用培养基（产品货号：SNLM-105）作为KATO III(人胃癌细胞)的专用培养基。
