HepG2(人肝癌细胞)

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货号: SNL-083 分类: 收录: ATCC培养基: EMEM(MEM+NEAA)+10% FBS+1% P/S来源: 肝癌;男性;15岁规格: 1×10⁶Cells/T25培养瓶或1mL冻存管

一、HepG2细胞基本属性

细胞名称 HepG2(人肝癌细胞)
细胞别称 HEP-G2;HepG2;HEPG2;Hep-G2;HEPG2
细胞货号 SNL-083
来源 肝癌;男性;15岁
细胞形态 上皮细胞样(卵圆形或多角形)
细胞类型
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 2
致瘤性 No, in nude mice.
培养条件 EMEM(MEM+NEAA)+10% FBS+1% P/S
培养环境 37℃;5% CO2;饱和湿度
细胞简介 HepG2细胞是从患有肝癌的15岁白人男性青年的肝细胞癌中分离出来,细胞表达甲胎蛋白、白蛋白α2-巨球蛋白、α1抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α1抗胸腺蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原补体(C4)、C3活化剂、纤维蛋白原、α1酸性糖蛋白、α2-HS糖蛋白、β-脂蛋白、视黄醇结合蛋白等基因。HepG2细胞表达标志物包括胰岛素;胰岛素样生长因子II(IGF II)。HepG2细胞表现3-羟基-3-甲基戊二酰-CoA还原酶和肝甘油三酯脂肪酶活性,对葛兰素酮(氧化应激)的刺激表现为apoA-I mRNA表达减少、过氧化氢酶mRNA表达增加。没有证据表明HepG2细胞中存在乙型肝炎病毒基因组。除了基于原始出版物(PubMed:6248960)的所称的肝细胞癌或肝癌细胞系外,HepG2也被称为肝母细胞瘤细胞系(PubMed:19751877)。HepG2细胞系由Wistar研究所保藏,是合适的转染宿主。

二、HepG2细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、HepG2细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞培养时黑点可能会比较多,具体原因参见培养操作说明2、3条; 2.细胞生长较慢,注意控制细胞密度不要过低;

我们推荐使用尚恩生物 人肝癌细胞专用培养基(产品货号:SNLM-083)作为HepG2(人肝癌细胞)的专用培养基。

HepG2(人肝癌细胞)收货处理方式

HepG2(人肝癌细胞)培养操作说明

HepG2(人肝癌细胞)售后规定

HepG2(人肝癌细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息
HepG2(人肝癌细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息

细胞基因分型图谱
HepG2(人肝癌细胞)细胞基因分型图谱

HepG2细胞出现空泡是否正常?

HepG2人肝癌细胞的胞内空泡是其常见生理特征(含脂滴或分泌泡),通常不影响增殖和实验功能。但需注意区分正常空泡与病理性变化:若空泡短期内大量增多或伴随细胞肿胀、碎裂,可能提示消化过度(胰酶作用>3分钟)、血清质量差(如内毒素超标)或支原体污染。建议定期观察空泡形态(正常为均匀小泡),结合细胞生长速率(2-3天达80%汇合)和培养基pH(7.0-7.6)综合判断,异常时优先排查培养条件。

HepG2细胞生长缓慢怎么办?

HepG2人肝癌细胞生长缓慢可能由血清浓度不足(建议提升至15%-20%)、接种密度过低(≥1×10?/cm2)或培养基条件不佳(推荐DMEM+NEAA)导致。该细胞倍增时间约48-72小时,若传代后3天未达80%汇合,需检查CO?浓度(5%)、pH稳定性(7.0-7.4)及血清质量(低内毒素未灭活FBS优先)。首次传代比例建议1:2,避免过度消化(0.25%胰酶作用1-2分钟)以维持活性。

HepG2细胞贴壁不良或聚团是什么原因?

HepG2人肝癌细胞贴壁异常或聚团通常与血清质量(推荐低内毒素未灭活胎牛血清)和培养基pH波动(7.0-7.4为佳)密切相关。若细胞呈现聚集倾向,可尝试以下优化:1血清调整:短期提高浓度至15%-20%(不超过20%)以增强贴壁因子作用;2消化控制:胰酶作用时间控制在1-2分钟(0.25%胰酶),避免过度损伤膜蛋白;3接种密度:确保≥1×10?/cm2,过低会导致细胞外基质分泌不足。同步检查CO?浓度(5%)和培养瓶透气性,培养基偏黄/紫时立即调整pH或换液。

HepG2细胞传代后漂浮细胞增多怎么办?

HepG2人肝癌细胞传代或复苏后出现部分漂浮细胞属正常现象,可能与消化时间过长(建议0.25%胰酶作用30秒-1分钟)或机械损伤(吹打力度需轻柔)有关。若漂浮细胞活性良好(台盼蓝验证),可离心后重接种至原瓶,并短期提高血清浓度至15%-20%(不超过20%)以增强贴壁因子作用。注意:HepG2细胞初始贴壁较慢,建议传代后48小时内减少移动观察,避免干扰贴壁过程;同时确保CO?浓度(5%)和培养基pH(7.0-7.4)稳定,避免环境波动加剧悬浮。

HepG2细胞培养中出现圆形细胞是什么原因?

在HepG2人肝癌细胞培养中,贴壁单层上粘附的圆形细胞通常是未完全贴壁的新接种细胞或处于分裂期的细胞,属于正常现象。该细胞系本身具有岛状堆叠生长特性,圆形细胞可能伴随空泡现象(不影响活力),无需特殊处理。若背景干净无碎片,仅需维持常规培养条件(如5% CO?、37℃),避免频繁晃动培养瓶即可。