Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞)
Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞)

Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞)

¥1,500.00

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货号： SNL-082 分类： 标签： 收录： ATCC培养基： EMEM(MEM+NEAA)+10% FBS+1% P/S来源： 肝癌；男性；8岁规格： 1×10⁶cells/T25培养瓶
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一、Hep 3B2.1-7细胞基本属性

细胞名称 Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞)
细胞别称 Hep3B2_1-7；Hep3B2；HEP-3B2；HEP3B2；Hep-3B；HEP-3B；Hep3B；Hep3B；HEP3B
细胞货号 SNL-082
来源 肝癌；男性；8岁
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 肿瘤细胞
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 2
致瘤性 Yes, in nude mice.
培养条件 EMEM(MEM+NEAA)+10% FBS+1% P/S
培养环境 37℃；5% CO2；饱和湿度
细胞简介 Hep 3B2.1-7细胞来自患有肝癌的8岁黑人患者的肝组织。Hep 3B2.1-7细胞的染色体模式数目为60，在裸鼠中能致瘤。Hep 3B2.1-7细胞表达甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、白蛋白、α2-巨球蛋白（α-2-巨球蛋白）、α1抗胰蛋白酶（α-1-抗胰蛋白酶）、转铁蛋白、α1抗胸腺蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原补体（C3，C4）、C3激活剂、纤维蛋白原、α1酸性糖蛋白、α2-HS糖蛋白、β-脂蛋白、视黄醇结合蛋白等基因。Hep 3B2.1-7细胞整合了完整的乙型肝炎病毒基因组，需在2级生物安全防护下操作。Hep 3B2.1-7细胞可以用于3D细胞培养、癌症研究、高通量筛选、传染病研究、性传播疾病研究和毒理学研究，也是一种合适的转染宿主。

二、Hep 3B2.1-7细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；
4.将培养瓶放入37度培养箱消化；
5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；
6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、Hep 3B2.1-7细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml，1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

Tips：1.细胞培养时黑点可能会比较多，具体原因参见培养操作说明2、3条； 2.细胞贴壁偏弱，消化时间偏短，注意控制消化时间； 3.不建议使用高糖DMEM培养，可能会导致细胞形态发生改变；

我们推荐使用尚恩生物 人肝癌细胞专用培养基（产品货号：SNLM-082）作为Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞)的专用培养基。

Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞)收货处理方式

Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞)培养操作说明

Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞)售后规定

Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息
Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息

细胞基因分型图谱
Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞)细胞基因分型图谱

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如何精细调控Hep 3B2.1-7细胞的消化流程以避免损伤？?

Hep 3B2.1-7人肝癌细胞对消化高度敏感，需采用分阶段观察策略严格控制消化时间。建议PBS润洗细胞后，将0.25%胰酶（含EDTA）加入培养瓶，37℃消化并每30秒显微镜观察一次，当细胞边缘回缩并开始脱壁时立即终止。吹打时使用1mL枪头以45°角贴壁缓慢吹吸，循环次数控制在10次以内，离心参数设置为1000rpm×3min。

Hep 3B2.1-7细胞培养中黑点增多的独特处理方法是什么？?

Hep 3B2.1-7人肝癌细胞培养时出现的黑点主要由细胞代谢产物、碎片及培养基析出成分（如反复冻融的血清蛋白沉淀）共同作用形成。建议换液时用37℃预热的PBS轻柔润洗1-2次，每次润洗后倾斜培养瓶静置1分钟以清除游离颗粒。润洗不能清除的黑点可以消化细胞重新接种，消化完成后加完全培养基终止消化，混匀细胞，收集细胞悬液900-1000rpm(约150g)离心3min，弃上清。再加5ml PBS重悬细胞，再离心后，用完全培养基重悬接种到新的培养皿。第二次PBS重悬是为了去除碎片，如果平时碎片比较少，传代时可以省略PBS重悬的步骤；如果碎片很多，建议PBS多洗几次。

如何增强Hep 3B2.1-7细胞的贴壁稳定性？专业策略有哪些？?

Hep 3B2.1-7人肝癌细胞贴壁较弱是其显著特性，运输低温、试剂过冷或机械震动易引发细胞回缩变粗短，需立即放回37℃培养箱静置4小时以上恢复。建议使用塑料培养瓶或多聚赖氨酸包被的T-25瓶增强附着力，培养基及PBS需预热至37℃后使用。消化时严格控制胰酶作用时间（30秒至1分钟），当细胞间隙扩大并少量脱落时即终止，避免过度损伤膜蛋白。传代后24小时内避免移动培养瓶，吹打次数限制在10次以内。必要时可向完培中补加5%～10%血清促进细胞贴壁。

为何Hep 3B2.1-7细胞培养需避免高糖DMEM？选择何种培养基更适宜？?

Hep 3B2.1-7人肝癌细胞对培养基成分敏感，尚恩经过培养验证EMEM(MEM+NEAA)更适合Hep 3B2.1-7生长和形态维持。使用高糖DMEM培养，可能会导致细胞形态和生长速度发生改变。若实验要求更换培养基，需要梯度混合新旧培养基，逐步过渡使细胞适应新环境。