一、Hep 3B2.1-7细胞基本属性 |
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细胞名称 | Hep 3B2.1-7(人肝癌细胞) |
细胞别称 | Hep3B2_1-7;Hep3B2;HEP-3B2;HEP3B2;Hep-3B;HEP-3B;Hep3B;Hep3B;HEP3B |
细胞货号 | SNL-082 |
来源 | 肝癌;男性;8岁 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 2 |
致瘤性 | Yes, in nude mice. |
培养条件 | EMEM(MEM+NEAA)+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | Hep 3B2.1-7细胞来自患有肝癌的8岁黑人患者的肝组织。Hep 3B2.1-7细胞的染色体模式数目为60,在裸鼠中能致瘤。Hep 3B2.1-7细胞表达甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、白蛋白、α2-巨球蛋白(α-2-巨球蛋白)、α1抗胰蛋白酶(α-1-抗胰蛋白酶)、转铁蛋白、α1抗胸腺蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原补体(C3,C4)、C3激活剂、纤维蛋白原、α1酸性糖蛋白、α2-HS糖蛋白、β-脂蛋白、视黄醇结合蛋白等基因。Hep 3B2.1-7细胞整合了完整的乙型肝炎病毒基因组,需在2级生物安全防护下操作。Hep 3B2.1-7细胞可以用于3D细胞培养、癌症研究、高通量筛选、传染病研究、性传播疾病研究和毒理学研究,也是一种合适的转染宿主。 |
二、Hep 3B2.1-7细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基; 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS; 3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层; 4.将培养瓶放入37度培养箱消化; 5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化; 6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清; 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、Hep 3B2.1-7细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞培养时黑点可能会比较多,具体原因参见培养操作说明2、3条; 2.细胞贴壁偏弱,消化时间偏短,注意控制消化时间; 3.不建议使用高糖DMEM培养,可能会导致细胞形态发生改变;
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