一、SW480细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | SW480(人结肠腺癌细胞) |
| 细胞别称 | SW-480；SW480；SW480E |
| 细胞货号 | SNL-074 |
| 来源 | 结肠腺癌；男性；50岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | Yes. Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. |
| 培养条件 | L15+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；100%空气；饱和湿度 |
| 细胞简介 | SW480 [SW-480]细胞源自50岁Dukes C结直肠癌白人男性患者原位直肠腺癌，后来SW620细胞源自同一病人一年后的淋巴结转移。SW480 [SW-480]细胞表达EGF, CSAp和直肠抗体3阴性，角蛋白阳性。SW480 [SW-480]细胞p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代，309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代。SW480 [SW-480]细胞高水平表达p53蛋白，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性，癌基因N-myc的表达未做检测，不表达Matrilysin（一种与肿瘤侵袭相关的金属蛋白酶）。有报道称，SW480 [SW-480]细胞表达GM-CSF。SW480 [SW-480]细胞ras原癌基因的12位密码子有一个突变，可以用作PCR法检测该突变的阳性对照。1978年11月，A·Leibovitz将其提交给ATCC时已传代至第91代。SW480 [SW-480]细胞可以用于3D细胞培养和癌症研究，也是一种合适的转染宿主。 |
二、SW480细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、SW480细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.L15培养基不需要5%二氧化碳，使用37度培养箱空气培养即可； 2.细胞生长偏慢，注意控制细胞密度不要过低; 3.细胞培养时黑点可能会比较多，具体原因参见培养操作说明2、3条；
我们推荐使用尚恩生物 人结肠腺癌细胞专用培养基（产品货号：SNLM-074）作为SW480(人结肠腺癌细胞)的专用培养基。
