HT-29(人结肠癌细胞)

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SKU: SNL-069 分类: 标签: 收录: ATCC培养基: McCoy’s 5a来源: 结肠腺癌;女性简称: HT-29规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶

一、HT-29细胞基本属性

细胞名称 HT-29(人结肠癌细胞)
细胞别称 HT 29; HT29
细胞货号 SNL-069
来源 结肠腺癌;女性;44岁
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 肿瘤细胞
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 1
致瘤性 Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade I); tumors also form in steroid treated hamsters.
培养条件 McCoy's 5a+10% FBS+1% P/S
培养环境 空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%
细胞简介 HT-29细胞是由J·Fogh在1964年用移植培养方法从一名44岁白人女性结肠直肠癌患者的原发肿瘤中分离出来,在和含15S的F12培养液中培养。近来,已建株的HT-29细胞用含10%血清McCoy's5A培液培养。HT-29细胞在裸鼠中致瘤,也能在类固醇处理的地鼠中致瘤。HT-29细胞合成IgA、CEA、TGFβ结合蛋白和黏液素等;表达尿激酶受体,但没有检测到血浆酶原活性;不表达CD4,但细胞表面表达半乳糖神经酰胺(HIV的可能替代受体)。HT-29细胞的超微结构特征包括微绒毛、微丝、带有深色颗粒的大空泡线粒体、带有游离核糖体的光滑粗面内质网、脂滴、少量初级溶酶体和许多次级溶酶体。细胞表达尿激酶受体,但不具有可检测的纤溶酶原激活活性。HT-29细胞CD4呈阴性,但细胞表面存在半乳糖神经酰胺(一种可能的HIV替代受体)的表达。HT-29细胞c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis和fos癌基因表达阳性,但未检测到N-myc癌基因表达,p53抗原过度产生,p53基因的密码子273存在G->a突变,导致Arg->His取代。HT-29细胞可以用于3D细胞培养、高通量筛选、癌症研究和毒理学研究,也是一种合适的转染宿主。

二、HT-29细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、HT-29细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞培养时黑点可能会比较多,具体原因参见培养操作说明2、3条;

我们推荐使用尚恩生物 人结肠癌细胞专用培养基(产品货号:SNLM-069)作为HT-29(人结肠癌细胞)的专用培养基。

HT-29(人结肠癌细胞)收货处理方式

HT-29(人结肠癌细胞)培养操作说明

HT-29(人结肠癌细胞)售后规定

HT-29细胞STR分型结果及匹配其细胞库信息

细胞基因分型图谱