A-431(人表皮癌细胞)

¥1,500.00

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货号: SNL-066 分类: 标签: 收录: ATCC培养基: DMEM+10% FBS+1% P/S来源: 外阴鳞状细胞癌;女性;85岁规格: 1×10⁶cells/T25培养瓶

一、A-431细胞基本属性

细胞名称 A-431(人表皮癌细胞)
细胞别称 A431;A431/P
细胞货号 SNL-066
来源 外阴鳞状细胞癌;女性;85岁
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 肿瘤细胞
生长特性 贴壁细胞
收录 ATCC
生物安全等级 1
致瘤性 Yes, forms rapidly growing subcutaneous tumors in immunosuppressed mice and colonies in soft agar.
培养条件 DMEM+10% FBS+1% P/S
培养环境 37℃;5% CO2;饱和湿度
细胞简介 A-431源自一位患有表皮样癌的85岁女性表皮,是由D·J·Giard等人建立的一系列细胞株中的一株。A-431细胞在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤快速增长的皮下肿瘤,在普通成纤维细胞饲养层和琼脂上形成克隆。A-431细胞是一个超三倍体人细胞株。A-431可用于3D细胞培养、高通量筛选、癌症研究、毒理学和免疫肿瘤学研究,也是一种合适的转染宿主。

二、A-431细胞培养操作

换液周期 2-3天
培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

三、A-431细胞冻存操作

冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格 200-300万/ml,1ml每管
冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞贴壁偏紧,消化时间偏长,注意控制消化时间; 2.细胞培养时黑点可能会比较多,具体原因参见培养操作说明2、3条; 3.培养时有部分细胞会漂浮死亡,漂浮细胞过多时及时换液清除; 4.细胞生长较慢,注意控制细胞密度不要过低;

我们推荐使用尚恩生物 人表皮癌细胞专用培养基(产品货号:SNLM-066)作为A-431(人表皮癌细胞)的专用培养基。

A-431(人表皮癌细胞)收货处理方式

A-431(人表皮癌细胞)培养操作说明

A-431(人表皮癌细胞)售后规定

A-431(人表皮癌细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息
A-431(人表皮癌细胞)STR分型结果及匹配其细胞库信息

细胞基因分型图谱
A-431(人表皮癌细胞)细胞基因分型图谱

A-431细胞传代消化总失败?关键操作技巧有哪些?

A-431细胞因贴壁牢固,用0.25%胰酶(含EDTA)放在培养箱里消化,因不同实验室使用的胰酶品牌不同,需根据实际情况调整时间。实际操作中,建议每消化1min拿出来看下,直到细胞部分自然滑落时再终止消化。变圆但未脱落时需要继续消化,确保细胞是被胰酶消化下来而不是被强行吹下的,避免细胞损伤。部分自然滑落时立即用原瓶胰酶轻柔吹打至完全脱落,再添加含血清培养基终止反应。此操作可避免A-431细胞中途重新贴壁形成团块。若采用分步消化法,可进一步降低机械损伤风险。

A-431细胞增殖慢?如何优化接种密度提升生长速度

A-431细胞增殖缓慢常与接种密度过低相关,可通过优化接种密度显著提升生长速度。低密度接种(如<5×10^3 cells/cm2)易导致细胞间信号分子不足,使细胞停滞于G0期而增殖迟缓;高密度接种(>2×10^4 cells/cm2)则可能因代谢废物(如乳酸)堆积或营养耗竭触发接触抑制。建议将接种密度调整至8×10^3-1.2×10^4 cells/cm2,既能保证细胞快速贴壁并形成有效细胞间接触(促进增殖信号传递),又可避免拥挤。接种后24小时需显微镜观察细胞状态,若无凋亡碎片,则表明密度适宜;若细胞仍呈孤立圆球状,可适当提高密度至1.5×10^4 cells/cm2。通过动态调整密度与培养条件,A-431细胞可在3-4天内达80%汇合度,显著缩短实验周期。

A-431细胞培养小黑点频现?如何辨别污染与正常代谢

在A-431细胞培养中,小黑点可能源于代谢产物或污染,需结合动态观察与培养基变化综合判断。代谢产物通常表现为无运动性的圆形/不规则颗粒,如脂滴或蛋白质聚集物,或培养基成分(如血清脂质)的沉淀,显微镜下无规律分布且随换液减少,培养基清澈、pH稳定。污染则需警惕:细菌污染会定向快速游动,随时间增殖导致培养基浑浊、pH下降(变黄);支原体污染可能是细胞产生微小颗粒或丝状物(但支原体本身无法通过光学显微镜观察到),抑制细胞生长,培养基清澈但细胞状态变差。建议结合显微镜观察、培养基浑浊度及pH变化快速排查,必要时通过PCR进一步检测支原体,以确保细胞健康。

A-431细胞漂浮细胞过多?如何判断正常代谢还是污染信号

A-431人表皮癌细胞培养中出现少量漂浮细胞属于正常现象,主要源于其代谢旺盛产生的碎片或传代时机械损伤(如吹打力度过大)。常规处理可通过换液去除漂浮细胞,并配合PBS润洗减少碎片残留。需警惕异常情况:若漂浮细胞伴随培养基浑浊、pH异常或细胞变形/死亡,需排查支原体污染(推荐PCR法)或操作失误(如过度消化、消化不彻底、吹打过猛)。