一、K562细胞基本属性 |
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| 细胞名称 | K562(人慢性髓原白血病细胞) |
| 细胞别称 | K-562; K.562; K 562; KO; GM05372; GM05372E |
| 细胞货号 | SNL-042 |
| 来源 | 慢性髓细胞白血病；女性；53岁 |
| 细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 悬浮细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | Yes, in nude mice.Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 10^7 cells. |
| 培养条件 | IMDM+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 空气，95% ； 二氧化碳 (CO2)，5% |
| 细胞简介 | K562细胞是由Lozzio从一名慢性髓细胞性白血病急变期的53岁女性患者的胸水中分离建立的，曾被认为来源于粒系，处于高度未分化阶段，Anderson等人作了细胞膜特性的研究后，认为该细胞是红白血病细胞系。K562细胞表达CD7（25％），EBNA阴性。K562的原始细胞是一种具有多向分化潜能的造血系统的恶性肿瘤细胞，能自发分化为红系、粒系和单核系的可辨识的祖细胞。K562细胞是对自然杀伤细胞高度敏感的体外靶标，故而被广泛应用于这方面的研究，也可以用于3D细胞培养、免疫系统紊乱和免疫学研究，也是一种合适的转染宿主。 |
二、K562细胞培养操作 |
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| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清； 2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 3.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、K562细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：1.细胞悬浮圆形生长，偶有小聚团，大量细胞圆形附着瓶底； 2.圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞，如果无法判断，可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率； 3.悬浮细胞密度维持1E5-5E5/ml之间，密度过低或者过高可能会影响细胞状态；
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