一、HMy2.CIR细胞基本属性 |
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细胞名称 | HMy2.CIR(人B淋巴母细胞) |
细胞别称 | Hmy.2CIR;HMy2.CIR;C1R |
细胞货号 | SNL-011 |
来源 | 外周血B细胞;EBV转染;女性;33岁 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 2 |
致瘤性 | |
培养条件 | IMDM+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | HMy2.CIR细胞是ARH-77细胞株的快速生长突变株Hmy.2B经γ射线照射,选择HLA I型抗原表达缺失的细胞而得到的细胞株。HMy2.CIR细胞不表达HLA A位点和B位点的产物,但表达少量HLA Cw4。HMy2.CIR细胞适于用作I型主要组织相容性抗原基因的转染宿主。有报道称,ARH-77细胞呈EB核抗原阳性(EBNA+)和EB病毒荚膜抗原阳性(EBVCA+)。由于Hmy2.CIR细胞起源于ARH-77细胞株的快速生长突变株Hmy.2B,推测HMy2.CIR细胞也是EBNA+。 |
二、HMy2.CIR细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清; 2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 3.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 部分悬浮细胞会附着瓶底,轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、HMy2.CIR细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80 度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20 度静置 2h 后转入-80 度过夜,第二天转入液氮保存。 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞悬浮生长,形态各异,偶有小聚团,部分细胞附着瓶底; 2.圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞,如果无法判断,可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率; 3.悬浮细胞密度维持1E5-5E5/mL之间,密度过低或者过高可能会影响细胞状态;
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