| 产品名称 | 7-AAD染色液（即用型） |
| 货号 | SNK-025 |
| 规格 | 1mL |
| 简介 | 7-AAD中文名称7-氨基放线菌素 D，是一种核酸染料，可以与细胞核内的核酸结合。正常情况下，活细胞具有完整的细胞膜结构，7-AAD无法透过细胞膜，从而无法于核酸结合，一旦有死细胞，细胞膜透选择透过性丧失，7-AAD就可以与核酸结合并产生远红外荧光（Em 655nm），从而对死细胞进行标记，通过荧光显微镜或者流式细胞仪 进行检测分析。激发光方面7-AAD与PI类似，均可以采用488nm激发，但采用532 nm激光激发可以产生最大荧光强度；发射光方面7-AAD发射光谱比 PI 窄，发射波长更长并在远红外区，对其他检测通道干扰小，在多重荧光染色中是 PI 的理想替代品。 本试剂盒可以对细胞爬片，贴壁细胞，悬浮细胞等进行检测死细胞情况。 |
| 使用方法 | 一、流式细胞仪检测： 1.收集细胞，若是贴壁细胞，需要对细胞进行消化收集，悬浮细胞可直接收集。 2.300g 离心 5 min，去上清，加入 1 mL PBS 重悬细胞沉淀，300g 离心 5 min，弃上清，重复洗涤 1 次，弃上清。 3.每组 1~5×105 个细胞加入 200 μL 7-AAD 染色工作液重悬，室温避光孵育 5~15 min。 4.孵育完成后，可以直接进行流式细胞仪检测，记录激发波长 488 nm或532nm ,发射波长为655nm左右荧光。若不能及时检测，可以避光置于 4°C 冰箱，2小时内进行流式细胞仪检测。 注意：如要对细胞进行活细胞和死细胞分析，可以与其他荧光染料同时染色，进行流式检测分析。 二、荧光显微镜检测：（以接种孔板的贴壁细胞为例） 1.吸弃贴壁细胞的旧培养基，每孔加入适量 PBS 洗涤细胞，去除 PBS，重复洗涤 1 次，弃去PBS。 2.按照 96 孔板每孔 100 μL 或 24 孔板每孔 200 μL 的比例加入 7-AAD 染色工作液覆盖培养板整个孔底，37°C 孵育 10~30min。 3.孵育结束后，在荧光显微镜下观察染色效果（7-AAD 为远红外荧光，Em=655nm）。 注意：若是细胞爬片，可以按照以上步骤操作；若是悬浮细胞，则收集细胞沉淀至EP管PBS清洗后，按照 1~5×105 个细胞量加入 200 μL 的7-AAD染色工作液重悬细胞，室温避光孵育 15~20 min后，吸取细胞悬液滴加在干净的载玻片上，轻轻盖上盖玻片即可在显微镜下观察拍照。 |
| 浓度 | 1X（即用型） |
| 存储条件 | 2~8°C避光保存 |
| 保质期 | 一年 |
注意事项：
1.染色后尽早检测，避免细胞坏死增多造成假阳性。
2.PI 溶液 对人体有刺激, 操作时请小心, 并注意适当防护以免直接接触人体或吸入体内。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
