PI染色液(即用型)

¥200.00

武汉尚恩生物细胞周期检测试剂盒采用DNA含量分析法,通过流式细胞术测定DNA含量进行细胞周期分析,确定不同时期的细胞群百分比。其原理是利用细胞内 DNA 能够和某些特定荧光染料(如PI,DAPI等)特异性结合,并对其进行标记,含量检测。

10mL
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SKU: SNK-017 分类: 标签:
产品名称 PI染色液(即用型,10ug/ml)
货号 SNK-017
规格 10mL
简介 PI(Propidium Iodide),中文名称碘化丙啶,是一种核酸染料,可以与细胞核内的核酸结合。正常情况下,活细胞具有完整的细胞膜结构,PI分子量较大,无法透过细胞膜,从而无法于核酸结合,一旦有死细胞,细胞膜透选择透过性丧失,PI就可以与核酸结合并产生强烈的红色荧光,从而对死细胞进行标记。通过荧光显微镜或者流式细胞仪(Ex/Em=535nm/617nm)进行检测分析。
本试剂盒可以对细胞爬片,贴壁细胞,悬浮细胞等进行检测死细胞情况。
使用方法 流式细胞仪检测:
1.收集细胞,若是贴壁细胞,需要对细胞进行消化收集,悬浮细胞可直接收集。
2.300g离心5 min,去上清,加入1 mL PBS重悬细胞沉淀,300g离心5 min,弃上清,重复洗涤1次,弃上清。
3.每组1~5×105个细胞加入200μL PI染色工作液重悬,室温避光孵育5~15 min。
4.孵育完成后,可以直接进行流式细胞仪检测,记录激发波长488 nm处红色荧光。若不能及时检测,可以避光置于4°C冰箱,2小时内进行流式细胞仪检测。
注意:如要对细胞进行活细胞和死细胞分析,可以与其他荧光染料同时染色,进行流式检测分析。
荧光显微镜检测:(以接种孔板的贴壁细胞为例)
1.吸弃贴壁细胞的旧培养基,每孔加入适量PBS洗涤细胞,去除PBS,重复洗涤1次,弃去PBS。
2.按照96孔板每孔100μL或24孔板每孔200μL的比例加入PI染色工作液覆盖培养板整个孔底,37°C孵育10~30min。
3.孵育结束后,在荧光显微镜下观察染色效果(PI为红色荧光,Ex/Em=535nm/617nm)。
注意:若是细胞爬片,可以按照以上步骤操作;若是悬浮细胞,则收集细胞沉淀至EP管PBS清洗后,按照1~5×105个细胞量加入200μL的PI染色工作液重悬细胞,室温避光孵育15~20 min后,吸取细胞悬液滴加在干净的载玻片上,轻轻盖上盖玻片即可在显微镜下观察拍照。
浓度 即用型,10ug/ml
存储条件 2~8°C避光保存,避免反复冻融。
保质期 保质期1年。

注意事项:
1.染色后尽早检测,避免细胞坏死增多造成假阳性。
2.PI溶液对人体有刺激,操作时请小心,并注意适当防护以免直接接触人体或吸入体内。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。