产品名称 | 增强型CCK8细胞活力、毒性检测试剂盒 |
货号 | SNK-010 |
规格 | 100 次/500 次 |
简介 | 增强型CCK8试剂盒,简称WST-8,是一种基于WST-8的快速、高灵敏度,用于细胞活力、增殖和细胞毒性检测的试剂盒。该试剂盒只需0.5-1 小时即可完成测试,并且比传统CCK-8试剂盒更快,更敏感,并且具有更宽的线性范围。本试剂盒适用于450nm左右吸光度的测定。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子偶联试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原,生成橙黄色可溶性的formazan。细胞增殖得越多越快,颜色就越深;细胞毒性越强,颜色越浅。颜色的深度和细胞数目之间存在线性关系。与WST-1相比,WST-8更检测灵敏度更高,更易溶解,更加稳定。本试剂盒经过优化,培养时间大大缩短,一般仅需0.5-1 小时即可完成检测。本试剂盒检测非常便捷,只有一管配置好的增强型CCK-8溶液,不需要进一步制备和其他操作。无须使用同位素,所有的检测步骤都在同一个96孔板上进行。酚红和血清对试剂盒的测定无显著影响。 本品对细胞无明显毒性。加入增强CCK-8溶液后,可在不同时间反复用酶标仪读板,使检测时间更加灵活,方便找到最佳测定时间。96孔板每100μL细胞需要10μL增强CCK-8溶液,该试剂盒每1mL可进行100次检测。 |
使用方法 | 1.提前将细胞按实验需要接种到96孔培养板里(细胞增殖实验建议2000个/孔/100μL,细胞毒性实验建议5000个/孔/100μL,具体接种数量可以视实验需要及细胞增殖速度调整),待细胞贴壁后,按照实验设计进行加药、细胞因子刺激、转染等细胞处理; 2.细胞处理完成后,每孔加入10μL增强型CCK8工作液,如果担心药物会干扰检测,需设置加了相应量细胞培养液、药物和增强型CCK8工作液,但没有细胞的孔作为空白对照,然后在细胞培养箱内孵育0.5-4 h(建议预实验确定最佳孵育时间); 3.完成孵育后,在波长450 nm测定吸光度,若没有450nm滤光片,可以选择420-480nm处测定OD值,根据OD值判断活细胞数量以确定处理过程对细胞活性的影响; 4.结果计算: ![]() |
产品组分 | ![]() |
存储条件 | 2-8℃或-20℃,避光保存。 |
保质期 | 2-8℃(一年)或-20℃(两年)(避光,避免反复冻融) |
注意事项:
1.试剂盒反复冻融会降低检测效果,虽然该试剂在反复冻融3次后对检测效果无明显影响,但可在第一次解冻后分装成小规格。反复冻融过程中可能出现少量沉淀,应将其平衡至室温,并尽可能溶解。
2.多数情况下,在细胞中加入增强型CCK8工作液孵育0.5-1小时可获得理想结果,但孵育时间因细胞类型、细胞密度等实验条件的不同而不同。
3.信号强度和稳定性会受到温度的影响,反应前将增强型CCK8工作液平衡至室温。
4.由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发问题。一方面,由于96孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加相同量的PBS、水或培养液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
5.本产品基于琥珀酸脱氢酶还原反应,样品中应尽量不含较多还原剂及抗氧化剂(还原型谷胱甘肽、巯基乙醇、维生素C等)。用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。
6.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。