一、WERI-Rb-1细胞基本属性 |
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细胞名称 | WERI-Rb-1(人视网膜神经胶质瘤细胞) |
细胞别称 | WERI-RB-1; WERI-Rb1; WERI-Rb1; WERI-RB1; WERIRb-1; WERI; WillsEyeResearchInstitute-Retinoblastoma-1 |
细胞货号 | SNL-470 |
来源 | 视网膜母细胞瘤;女性;1岁 |
细胞形态 | 圆形(葡萄状) |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | Yes, in rabbits |
培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | WERI-Rb-1细胞来源于1岁视网膜母细胞瘤女性患者,是R.M.McFall和T.W.Sery于1974年建立的两种人类视网膜母细胞瘤细胞系之一。WERI-Rb-1细胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。扫描电镜显示,在WERI-Rb-1细胞表面囊泡、板状伪足和微绒毛在数量上和概率上均会发生改变。WERI-Rb-1细胞可以用于3D细胞培养、细胞分化研究、肿瘤治疗的动物模型和生化评价,也是一种合适的转染宿主。 |
二、WERI-Rb-1细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清; 2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 3.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 部分悬浮细胞会附着瓶底,轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、WERI-Rb-1细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80 度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20 度静置 2h 后转入-80 度过夜,第二天转入液氮保存。 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞聚团成葡萄串状生长,偶有分散细胞,部分细胞附于瓶底,传代时可以吹下收集; 2.圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞,如果无法判断,可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率; 3.细胞生长较缓慢,注意控制密度,低密度培养细胞可能不长甚至死亡;建议1:2传代,可以用20S培养细胞; 4.细胞培养过程可能有较多细胞碎片产生,细胞碎片较多时及时换液清除;
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