一、DB细胞基本属性 |
|
细胞名称 | DB(弥漫大B细胞淋巴瘤细胞) |
细胞别称 | 无 |
细胞货号 | SNL-295 |
来源 | 弥漫性大B细胞淋巴瘤;男性;45岁 |
细胞形态 | 圆形 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | |
培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | DB细胞由Walter J.Urba和Dan L.Longo从一名弥漫性大细胞淋巴瘤患者的腹水中建立。DB细胞不表达HLA-DR、HLA-DQ、IgM、IgD。将DB细胞暴露于激活蛋白激酶C的佛波酯(PMA或PdBu)会导致严重的生长抑制。据报道DB细胞Epstein-Barr病毒基因组呈阴性。DB细胞先前的支原体污染通过用BM-cycine治疗21天治愈了。 |
二、DB细胞培养操作 |
|
换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清; 2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 3.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 部分悬浮细胞会附着瓶底,轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、DB细胞冻存操作 |
|
冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80 度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20 度静置 2h 后转入-80 度过夜,第二天转入液氮保存。 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
我们推荐使用尚恩生物 弥漫大B细胞淋巴瘤细胞专用培养基(产品货号:SNLM-295)作为DB(弥漫大B细胞淋巴瘤细胞)的专用培养基。