一、TF-1细胞基本属性 |
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细胞名称 | TF-1(人红白血病细胞) |
细胞别称 | TF1;MFD-1 |
细胞货号 | SNL-222 |
来源 | 红白血病;男性;35岁 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
收录 | 武大典藏中心CCTCC |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | |
培养条件 | 1640+10% FBS+2ng/mL GM-CSF+1% P/S |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | TF-1细胞是由Kitamura·T等人于1987年建立,源于一名35岁日本男性的肝素化骨髓抽取样本,该患者具有严重的全血细胞减少症。TF-1细胞生长完全依赖于IL-3或GM-CSF,对IL-5无反应。多种淋巴因子和细胞因子对TF-1细胞都有作用,如:IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。TF-1细胞不表达血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。细胞的形态和细胞化学特征及珠蛋白基因的持续性表达,显示TF-1细胞属于红系。血红素和δ-氨基乙酰丙酸诱导TF-1细胞血红蛋白合成,TPA诱导TF-1细胞显著分化为巨噬细胞样细胞。TF-1细胞为研究髓系祖细胞的增殖和分化提供了良好的系统。 |
二、TF-1细胞培养操作 |
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换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
传代方法 | 1.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清; 2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里; 3.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
注意事项 | 部分悬浮细胞会附着瓶底,轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
三、TF-1细胞冻存操作 |
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冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80 度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20 度静置 2h 后转入-80 度过夜,第二天转入液氮保存。 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
Tips:1.细胞需添加GM-CSF培养,否则细胞状态将变差至无法增殖;建议购买配套的完全培养基培养该细胞,货号:SNLM-222;
我们推荐使用尚恩生物 人红白血病细胞专用培养基(产品货号:SNLM-222)作为TF-1(人红白血病细胞)的专用培养基。